人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶ELISA試劑盒

rat aldosterone,ALD ELISA Kit  大鼠醛固酮(ALD)ELISA Kit
rat Noradrenaline,NA ELISA Kit   大鼠去甲腎上腺素(NA)ELISA Kit
rat Prostaglandin F,PG-F ELISA Kit  大鼠前列腺素F(PGF)ELISA Kit
rat Prostaglandin E1,PG-E1 Elisa kit  大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA Kit
rat Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit  大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA Kit
Rat bradykinin,BK ELISA Kit  大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA Kit
rat Resistin ELISA Kit  大鼠抵抗素(Resistin)ELISA Kit
rat prolactin,PRL ELISA Kit  大鼠催乳素(PRL)ELISA Kit

操作步驟

1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。