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士鋒生物具體層析方法:氣相色譜層析

來源:上海士鋒生物科技有限公司   2014年05月23日 07:36  

1)載氣 常用的載氣主要有氮、氬、氫和二氧化碳等。這些氣體一般都由高壓氣瓶供給
(2)進樣器 氣相色譜儀可以用于分離固相、氣相和液相標本。液相標本采用微升注射器穿過橡皮隔片注入,氣相標本采用特種氣相注射器注入。
(3)譜柱及加熱爐 色譜柱一般由金屬或玻璃制成,通常采用的柱長2m~4m,內徑2mm,毛細管柱長度可達20m~150m,內徑為0.2mm。
載體一般采用惰性、多孔的固體顆粒。多由硅藻土或玻璃珠制成,分析不同極性的微生物化合物,為了獲得zui適的分離條件,要求有不同固定相的載體。目前比較常用的載體有:聚乙二醇(CarbOwax 20M)、F F A P(聚乙二醇20M 和2-硝基對苯二甲酸的反應產物),OV-17(苯基甲基硅酮)。OV-210、SE-30(甲基硅酮)、Chromosorb G(白色硅藻土載體)等。柱加熱爐在溫度控制上是非常重要。
(4)紀錄儀
(5)數據處理裝置 一般均附有數據處理計算機。

試驗條件的選擇
(1)柱的選擇 要注意極性及zui高使用溫度,柱溫不能超過zui高使用溫度。固定相按極性相似的原則選擇。
色譜柱的內徑大小、長度都能影響分離率。一般而言,內徑越小,長度越長,分離效果越好,一般柱長為1m~5m(毛細管柱則20m~100m)。
填充劑顆粒一般采用40目~60目,60目~80目及80目~100目大小。長柱子宜用粒度大些的,以減少柱壓降,短柱子則用粒度細的。
氣相色譜中固定液的含量對分離效率的影響較大。一般采用固定液與載體重量之比為15︰100~25︰100。采用高靈敏度的檢測器,由于進樣量減少,固定液含量可以降至5︰100以下。這樣可以使用較低柱溫,從而提高柱效,縮短分析時間。但固定液用量太少會引起吸附。
(2)柱溫選擇 柱溫選擇對分離度影響很大,常是條件選擇的關鍵。選擇的基本原則是:在使zui難分離的組分有盡可能好的分離高度的前提下,盡可能采取較低溫度,但以保留時間適宜及不拖尾為度。
①高沸點混合物(200℃~400℃),若需在較低的柱溫下分析,可采用低固定液配比1%~3%,采用高靈敏檢測器,柱溫可比沸點低100℃~150℃,在200℃~250℃的柱溫下分析。

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