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血清學各項指標的檢測方法!

來源:上海聯碩生物科技有限公司   2010年05月26日 16:45  

實驗動物的種類繁多,各種指標的檢測方法往往各不相同,而且每個人在做動物試驗時所需要檢測的指標也各不相同,每個人掌握的測定方法也各不相同。

    能到本版來的各位戰友相信都做過動物試驗,也檢測過實驗動物的指標,希望各位戰友能將自己檢測實驗動物的各種指標時所使用的方法拿出來與大家分享。以至于dxy能夠將各位的實用方法系統的組織起來,形成一個比較完善的實驗動物常用指標的檢測方法!

    拋磚引玉:

一.體重的測量方法

動物體重的測量一般使用普通天平或電子天平等稱量儀器,在稱量前應禁食(不禁水),以減少食物對體重的影響。如果進行長期的實驗時,應每隔7~10天稱量一次。
小鼠、大鼠:稱量可用普通的天平或者電子秤稱重。
兔、豚鼠:可直接放在嬰兒秤上稱重,從嬰兒秤圓形刻度盤上讀取動物體重。
犬:經訓練后可直接放在磅秤上稱重。未經馴服的犬,先將犬嘴綁好,由實驗員把犬抱起站在磅秤上稱重,記下讀數,減去實驗員體重,即為動物體重。

二.體溫的測定方法

動物體溫測定可采用普通體溫計(肛表、口表)或半導體溫度計,為防止測定過程中動物掙扎,以至于挫傷腸壁或折斷體溫計,在測定前應先固定好動物。肛表測溫可由實驗者右手固定體溫計,3分鐘后取出觀察讀數。半導體點溫度計在測定時可立即從溫度表上讀取溫度數。
測定溫度時應注意如下幾點:
(1)  檢查肛表水銀柱是否已甩下來,半導體點溫度計的指針是否指在零位。
(2)  環境溫度對動物體溫的測定有一定的影響,一般環境溫度應控制在18~28℃。
(3)  測量溫度時應連續測定2~3次,取平均值。
(4)  插入直腸的深度取決于動物的大小,犬、貓、兔3.5~5cm,豚鼠3.5cm,大鼠、小鼠1.5~2.0cm。為了使插入深度一致,可用膠皮管套在溫度計上,作為“限止環”。
(5)  每次測定時間要一致。一般體溫計放入直腸內固定時間為3分鐘,而每天測定的時間也大致一樣,如*次在上午測定,以后均應在上午測定。
(6)  防止有大便阻塞和動物掙扎造成直腸損傷及出血現象。
(7)  測定時盡可能使動物處于自然狀態,勿使其過于緊張、恐懼。

三.脈搏的檢查方法

檢查犬、貓、兔等較大動物的脈搏時,先將動物略加固定,待其安靜后,用右手伸入動物股部內側,用手指按股動脈測脈率1分鐘,計算每分鐘脈搏次數。小動物的脈搏不易摸測,可直接在動物左側胸部用手觸及心跳zui明顯處,計數一定時間,算出每分鐘心跳次數,也可用聽診器或測量儀器進行測量。此外,在測量時應排除溫度、濕度、動物的興奮狀態、健康狀況、特殊的生理狀況等對脈搏的影響。

四.呼吸頻率的測定方法

根據呼吸原理,動物的呼吸次數測定方法有人工記錄法、氣管插管呼吸描記法、鼻插管呼吸描記法、記錄儀法(生理記錄儀法)。
(一)人工記錄法:測定呼吸頻率前,首先必須使動物處于相對安靜狀態,然后以肉眼觀察并記錄呼吸的次數,一般要求記錄1分鐘的呼吸次數。
(二)氣管插管描記法:按氣管插管術插好Y型氣管插管,然后將Y形插管的一端經橡皮管與瑪利氣鼓相連,即可描記呼吸,另一端可作為呼吸備用通道,若需人工呼吸時,將此端與人工呼吸機送氣管相連,開動人工呼吸機即可進行人工呼吸。
(三)鼻插管描記呼吸法:將動物固定,插管連以橡皮管,將插管涂上液體石蠟后,插入一側鼻孔內,用膠布固定。橡皮管的另一端與瑪利氣鼓相連,描筆將呼吸活動記于記紋鼓上。轉動鼻插管的角度,使描筆的劃線達到zui大幅度。
(四)二道生理記錄儀測定法:將張力換能器與記錄儀和動物相連。經換能器導線輸入記錄儀,換能器彈簧經細線固定于動物體表一定位置,使細線牽張力適度。按測呼吸需要選擇適當的靈敏度、時間常數、濾波后,將前置測量開關置于通的位置。按下走紙速度鍵,即可描記呼吸變化曲線。

五.尿液的檢查方法

用清潔容器收集新鮮尿液,以晨尿為好,因晨尿濃度較高,易發現病理成分。
(一)  尿量檢查
常用實驗動物的尿量如下:
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
動物種類 尿量(mL) 動物種類 尿量(mL)
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
獼 猴 1 10—550 犬(4.5kg) 65—400
馬 1 900—11 400 貓(2—4kg) 40—120
牛 1 1400—19 400 兔(1.5—2.5kg) 60—250
豬 1 900—3 800 豚鼠 15—75
山羊 700—2 000 大鼠 10—15
綿羊 900—1 900 小鼠 1—3
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
1 尿量增多 一晝夜尿量超過正常值范圍,稱為多尿。生理性尿量增多見于大量飲水或食含水分過多的蔬菜所致。病理性尿量增多,見于糖尿病、尿崩癥等。
2 尿量減少 一晝夜尿量少于正常值范圍稱少尿。見于急性腎炎、急性腎功能衰竭等。
(二)尿色檢查 正常新鮮尿液多為黃色或淡黃色,尿的顏色多受食物或藥物的影響。病理情況下可有以下變化:
1 血尿 呈洗肉水樣或混有血凝塊。
2 血紅蛋白尿 呈濃茶色或醬油色,鏡檢無紅細胞,隱血試驗為陽性。
3 膽紅素尿 呈深黃色,振蕩后泡沫亦呈黃色。
4 乳糜尿 為乳白色尿液,有時混有少量血液。
(三)尿酸堿反應 正常一晝夜混合尿液呈弱酸性,pH值為5.4—8.4。在酸中毒、發熱時,尿液可呈較強酸性,可用pH試紙測定。

六.糞便的檢查方法

糞便檢查常用于了解糞便中有無炎性產物、血液、寄生蟲卵或蟲體等病理成分,并可判斷胃腸、胰腺、肝、膽功能狀態及糞便中有無致病菌。
(一)一般性狀檢查
1 顏色:黃褐、黑色、灰白、鮮紅等。
2 性狀:水樣或粥樣、粘液、膿樣、血樣。
3 氣味:特殊臭味、酸臭、***臭。
(二)顯微鏡檢查 在潔凈的載玻片上滴1滴生理鹽水,用木簽挑取少許糞便與生理鹽水混合,涂勻,厚度適中。仔細觀察各種細胞、阿米巴包囊及滋養體等。
(三)隱血檢查 當上消化道少量出血時,糞便外觀無異常改變。凡疑有上消化道少量出血,應進行隱血檢查。
隱血檢查時,將少許糞便涂于潔凈玻片或濾紙條上,加1%聯苯胺冰醋酸液及3%過氧化氫液各一滴。如無顏色改變為陰性反應;出現藍顏色變化為陽性反應。根據顏色出現的快慢和深度,將陽性結果分為四級:立即出現深藍色為(++++);30s內出現為(+++);l min內出現為(++);2min內出現為(+)。
正常為陰性,上消化道出血為陽性。

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