我們今天來給朋友們介紹一個檢測實驗，我公司所代理的酶聯(lián)免疫試劑盒因質(zhì)量的、價格的合理再加上銷售部的完善支持使得朋友們的信任，同時上海恒遠在這里也表示非常的感謝。今天上午我公司楊發(fā)來一則實驗說要特別分享給大家，下面我們就來看看用酶聯(lián)免疫法檢測瘤壞死因子的過程步驟。
原理：
    在微孔反應(yīng)板上包被抗人TNF-α單克隆抗體，待測標本和標準品中的TNF-a會與單克隆抗體結(jié)合，游離的成分被洗去，同時加入生物素化的抗人TNF-α抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。生物素與親和素特異結(jié)合，抗人TNF抗體與結(jié)合在單克隆抗體上的人TNF-α結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色劑，若反應(yīng)孔中有TNF-α，HRP會使無色的顯色劑呈現(xiàn)藍色，加終止液變黃色。在波長450nm處測吸光度，TNF濃度與吸光度成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中的TNF-α濃度。
試劑、材料所需：
    1、預(yù)包被微孔反應(yīng)板
    2、濃縮酶結(jié)合物
    3、酶結(jié)合物稀釋液
    4、標準品和標本稀釋液
    5、濃縮生物素化抗體
    6、IFN標準晶
    7、濃縮洗滌液
    8、顯色劑A、B
    9、終止液
    10、酶標儀或全自動酶聯(lián)免疫檢測儀 
步驟
    1、在微孔反應(yīng)板相應(yīng)孔中分別加入待測樣本、不同濃度標準品100txl，再加生物素化抗體工作液50tzl。
    2、振蕩混勻，置20-25℃環(huán)境中溫育120min。
    3、將孔內(nèi)液體吸干，用洗滌液充分洗滌5次，干燥。
    4、除空白孔外，加入酶結(jié)合物工作液100u1。
    5、振蕩混勻，置20-25℃環(huán)境中溫育30min。
    6、將孔內(nèi)液體吸干，用洗滌液充分洗滌5次，干燥。
    7、每孔加入顯色劑A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37C環(huán)境中避光顯色10min。
    8、加入終止液50ul后，輕輕振蕩混勻。用酶標儀(450nm波長)測定各孔吸光度，與標準曲線對照，求出TNF值。
    以上就是今天的實驗內(nèi)容了，我公司的五折*還剩下十天，需要的朋友們快來訂購酶聯(lián)免疫試劑盒哦！zui后我們來看下實驗中您需要注意的六條事項：
    1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)在室溫環(huán)境中平衡30min后方可使用，未用完的微孔條用自封袋密封保存。
    2、酶標板洗滌時各孔均需加滿洗滌液，防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。應(yīng)設(shè)定30～60s的洗滌浸泡時間。
    3、滴加試劑前應(yīng)將滴瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次，使液體混勻。滴加時瓶身應(yīng)保持垂直，以使滴量準確。
    4、所有樣品和廢棄物都應(yīng)按傳染源處理。終止液為2mol／L硫酸，使用時應(yīng)注意安全。
    5、每批樣本應(yīng)同時做標準曲線。
    6、若標本OD值在標準曲線測定范圍以外，應(yīng)適當稀釋后重測。