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免疫組織化學:幾種溶液的配制方法

來源:上海士鋒生物科技有限公司   2013年12月16日 07:51  

1、PBS:
取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸餾水中,混勻,測pH值應在7.2~7.4之間,若偏離此范圍,請用0.1N的HCL或NaOH調整。
2、TBS:
2.1 Tris緩沖液配方:(0.5 M pH7.6)
Tris(三羥甲基氨基甲烷)
60.57g
1N HCL
約420ml
雙蒸水
加至1000ml
Tris緩沖液配制方法:
先以少量雙蒸水(300~500ml)溶解Tris,加入HCl后,用HCl(1N)或NaOH(1N)將pH調至7.6, zui后雙蒸水加至1000ml。此液為儲備液,4℃冰箱中保存。
2.2 TBS配方:
Tris-HCI緩沖液(0.5M pH7.6)
100ml
NaCI
8.5~9g (0.15mol/L)
雙蒸水
加至1000ml
TBS配制方法:
先以少量雙蒸水溶解NaCl,再加入Tris-HCl緩沖液,zui后加雙蒸水至1000ml,充分搖勻。
3、枸櫞酸鹽緩沖液(Citrate buffer):
3.1 儲存液:
A. 0.1M枸櫞酸溶液:稱取21.01g枸櫞酸(C6H8O7·H20)溶于1000ml蒸餾水中。
B. 0.1M枸櫞酸鈉溶液:稱取29.41g枸櫞酸鈉(C6H5Na3O7·2H20)溶于1000ml蒸餾水中。
3.2 工作液:
取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸餾水中,溶液pH值應為6.0±0.1
4、胰酶(Trypsin):
4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液:
常用濃度為0.125%,即使用前將一滴試劑1胰酶溶液和三滴試劑2胰酶稀釋液均勻混合(1:3稀釋),則可直接滴加使用。胰酶的zui終濃度可以根據使用者的要求進行調整,濃度范圍可以從0.05%(1:10稀釋)至0.25%(1:1稀釋)。

 

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