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士鋒生物如何確定引物(含修飾)的分子量

來源:上海士鋒生物科技有限公司   2013年11月14日 00:11  

引物(含修飾)的分子量是如何確定的?

非修飾的引物的molecular Weight在隨引物提供的報告單上都有明確的標示。如果需要估計一個引物的分子量按每個堿基的平均分子量為324.5,引物的分子量=堿基數 x 堿基的平均分子量。或按下列公式計算MW= (NA * WA) + (NC * WC) + (NG * WG) + (NT * WT) +(Nmod * Wmod) +(Nx * )+( Ni* Wi) +16* Ns– 62.

NA, NG, NC, NT, Ni分別為引物中堿基A或G或C或T或I的數量,WA, WC, WG, W, Wi分別為引物中堿基A或G或C或T或I的分子量,Nmod,Wmod 分別為修飾基團的數目和分子量。

對于混合堿基的分子量為混合堿基的分子量總合除以混合數,例如G+A混合的分子量為(313.21+329.21)/2 = 321.21。Ns為硫代數目,硫代每個位置增加分子量16。

常規堿基分子量



Base Molecular Weight
A 313.21
C 289.18
G 329.21
T 304.19
I 314.2
U 290.17

常規修飾基團分子量

5’-Biotin 405.45 3’-TAMARA 623.60
5’-(6 FAM) 537.46 3’-Dabsyl 498.49
5’-HEX 744.13 3’-(6 FAM) 569.46
5’-TET 675.24 3’-Amino Modifier C3 153.07
5’-Cy5 533.63 3’-Amino Modifier C7 209.18
5’-Cy3 507.59 3’-Thiol Modifier C3 154.12

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