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操作過程中的問題造成假陽性

來源:上海滬鼎生物科技有限公司   2013年09月24日 09:08  

操作過程中的問題造成假陽性
在常見的elisa檢測實驗中,有很多的過程都會導致實驗失敗,一點小小的誤差也不能盡人意,所有操作過程中一定要注意這些方面,保證實驗成功。

3、1加樣
對于間接ELISA標本一般都要進行稀釋,如果加樣不準就會造成誤差,尤其當稀釋倍數大時,很小的誤差,會導致較大的相對誤差,使陰性(或弱陽性)標本呈陽性(或陰性)。加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產生氣泡。目前,大部分血站都已使用全自動酶免加樣系統處理標本,可較好地避免以上誤差。
3、2洗滌
在ELISA中正確的洗滌是保證得到可重復結果的關健一步,應引起操作者重視。無論是手工操作還是機器操作,得出不正確的結果常與不正確的洗滌有關,ELISA就是靠洗滌來達到分離游離和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以消除殘留在板孔中沒能與固體抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。
3、3 溫育
每種試劑都有其*反應模式,其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應時間長,會造成整板本底高,陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴,反應板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發,板上應加蓋。
3、4酶標儀判讀
作為記錄測定結果的儀器,酶標儀的性能穩定與否,決定結果的可靠度。首先酶標儀應定期進行保養,對濾光片要定期校正;其次酶標儀波長設置要正確,使用雙波長,一個檢測波長,一個參比波長,以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外,在用酶標儀讀數時先擦試微孔板底部并壓平板條。由于各種酶標儀性能有所不同。
以上四種方法都有可能在elisa試劑盒檢測上令結果不一樣,從而導致實驗失敗,我司技術在經過多次實驗中得出以上結論,所以elisa試劑盒實驗能否成功取決于多方面的因素,我司所售elisa試劑盒均可保證質量,提供免費技術指導及實驗代測服務,為您節省時間,提高實驗成功度,咨詢關于elisa試劑盒的任何問題。我們恭候您的光臨。

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