IgA的純化操作步驟

來源：上海恒遠生物科技有限公司 2013年08月23日 09:15

IgA的純化

血清中IgA的含量較低，一般從乳汁中提取分泌型IgA。

【材料和試劑】

（1）人初乳Xml。

（2）生理鹽水（NS），HCl。

（3）2mol/L Tris，0.1mol/L pH6.3 PB。

（4）0.01mol/L， pH7.5（含0.1mol/L NaCl）和0.01mol/L，pH7.7（含0.25mol/L NaCl）的PB。

【操作步驟】

（1）取Sephadex G-200 25g，經蒸餾水充分膨脹后，以0.01mol/L，pH6.3的PB平衡并裝柱，柱床體積為2.5cm×100cm。

（2）將10ml NS緩慢加入初乳中，混勻，43000r/min 4℃離心60min。

（1）吸出中層乳清液，以1mol/L HCl調至pH4.0，4℃ 24000r/min離心30min。

（2）吸取上清以2mol/L Tris 調至pH7.3，同上離心，取上清，以0.45μm硝酸纖維素膜過濾。

（3）收集濾出液過Sephadex G-200層析柱，以0.01mol/L，pH6.8 的PB低溫洗脫，0.3～0.5ml/min，分部收集，并以紫外監測儀280nm監測。

（4）*峰以IgM為主，第二峰為IgA，第三峰為IgG，收集合并第二峰各管，裝入透析袋中。

（5）對0.01mol/L，pH7.5（含0.1mol/L NaCl）的PB透析4～6h。

（6）過DEAE-Sephadex A-50柱，以0.01mol/L，pH7.5（含0.1mol/L NaCl）的PB洗脫至OD 280nm< 0.02。

（7）改用含0.25mol/L NaCl的PB洗脫，分部收集，280nm測蛋白峰，收集合并含蛋白的洗脫峰，濃縮后置-20℃保存。

我司多種*抗體展示：

相關產品

凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。

成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄中国色片,一级黄色蝶片,一级黄色片生活片