1）電解質(zhì) 抗原抗體結(jié)合后由親水膠體變?yōu)槭杷z體，此時(shí)易受電解質(zhì)影響。通常在抗原抗體反應(yīng)中，以8.5g/L NaCl溶液作為抗原抗體的稀釋液及反應(yīng)液，其中Na+和Cl-可分別中和膠體顆粒上的電荷，使膠體顆粒的電勢(shì)下降，形成可見的沉淀物或凝集物。若無電解質(zhì)存在，則不出現(xiàn)可見反應(yīng)。但如果電解質(zhì)濃度過高，則會(huì)出現(xiàn)非特異性蛋白質(zhì)沉淀，即鹽析。

　　2）酸堿度 pH過高或過低都可影響抗原和抗體的理化性質(zhì)。例如，當(dāng)pH為3左右時(shí)，可出現(xiàn)非特異性酸凝集。此時(shí)因接近細(xì)菌抗原的等電點(diǎn)，細(xì)菌表面蛋白或其他基團(tuán)所帶的電荷消失，其間互相的排斥力喪失而導(dǎo)致凝集，影響試驗(yàn)的可靠性。抗原抗體反應(yīng)一般以pH6～pH9為宜。

　　3）溫度 抗原抗體反應(yīng)zui適溫度為37℃。一般在15℃～40℃范圍內(nèi)進(jìn)行，在此范圍內(nèi)，溫度越高，分子運(yùn)動(dòng)速度加快，增加抗原抗體接觸機(jī)會(huì)，反應(yīng)速度越快，但亦容易引起復(fù)合物解離;溫度越低，反應(yīng)速度緩慢，但抗原抗體結(jié)合牢固，易于觀察。某些特殊的抗原抗體反應(yīng)需要特定的溫度，如冷凝集素在4℃時(shí)與紅細(xì)胞結(jié)合，20℃以上反而解離。