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血小板計(jì)數(shù)法(直接試管法)

來源:北京博蕾德生物科技有限公司   2013年06月17日 09:41  

 

1 原理 用一種能破壞血液中的紅細(xì)胞,但能保護(hù)血小板形態(tài)完整的稀釋液稀釋血液,滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池,在高倍鏡下直接計(jì)數(shù)血小板數(shù)。 2 器材和試劑 器材同白細(xì)胞計(jì)數(shù)法。稀釋液用許汝和氏尿素稀釋液。許汝和氏尿素稀釋液配制法:尿素10g,福爾馬林0.1ml, 枸櫞酸鈉0.5g,加水至100ml,溶解后過慮,在冰箱內(nèi)保存。 3 操作步驟 a.用2ml吸管準(zhǔn)確吸取血小板稀釋液0.38ml置小試管中。b.從耳垂采血,用0.02ml吸管準(zhǔn)確吸取*滴血,吹入稀釋液中,并吹吸兩次洗凈吸管壁內(nèi)的血。 c.充分振搖,滴入計(jì)數(shù)池,靜置15~20分鐘,使血小板下沉,以便計(jì)數(shù)。d.在高倍鏡下用計(jì)數(shù)紅細(xì)胞所用的5個(gè)中方格中的血小板數(shù),乘以1000,即得每立方毫米血中血小板數(shù)。 e.血小板在稀釋液中表現(xiàn)為富于折光之小點(diǎn),約為紅細(xì)胞的1/2~1/3大小。 4 注意事項(xiàng)

a.取血時(shí)動(dòng)作要迅速,穿刺要深。

b.一定要用*滴血,以使血小板保持完整,在稀釋液中易于分散。否則,血小板因耳垂受擠壓而破壞較多,形態(tài)也不規(guī)則,在稀釋液中不易分散,這樣,會(huì)使計(jì)數(shù)結(jié)果偏低。

c.尿素在室溫中容易分散而失效,故稀釋液盡可能小量配制,并保存于冰箱之中。

d.如紅細(xì)胞不*溶解,影響血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性時(shí),可加大稀釋倍數(shù),或另換稀釋液。

e.如室溫較高時(shí),可將滴好的計(jì)數(shù)池放在培養(yǎng)皿下,中間放一濕棉球,以防計(jì)數(shù)池中的稀釋液干掉。

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