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所謂大腸菌群，是指在37℃培養24h 內能發酵乳糖產酸、產氣的兼性厭氧的革藍氏陰性無芽孢桿菌的總稱。主要由腸桿菌科中四個屬內的細菌組成，即埃希氏桿菌屬、檸檬酸桿菌屬、克雷伯氏菌屬和腸桿菌屬。
水中大腸菌群的檢測方法，常用多管發酵法和濾膜法。多管發酵法可適用于各種水樣的檢驗，但操作繁瑣，需要的時間較長。濾膜法僅適用于自來水和深井水，操作簡單、快速，但不適用于雜質較多、易于堵塞濾孔的水樣。
蛋白胨 10g，牛肉膏 3g，乳糖5g，氯化鈉 5g，1.6％溴甲酚紫乙醇液 1.0mL，蒸餾水 1000mL，pH 7.2~7.4。
按上述普通乳糖蛋白胨培養液濃縮三倍配制，分裝于有杜漢氏小管的試管中，每管5mL。
蛋白胨 10g， 乳糖 10g，K2HPO4 3.5g，瓊脂 15～20g，蒸餾水1000mL，無水亞硫酸鈉 5g，5％的堿性品紅乙醇溶液 20mL，pH 7.2~7.4。
4、伊紅美藍培養基（EMB培養基）（供發酵法平板分離用，3和4可任選一種）
蛋白胨10g，乳糖10g，K2HPO4 2.0g，瓊脂20g，蒸餾水1000mL，2％伊紅（曙紅）水溶液 20mL，5％美藍（亞甲藍）水溶液13mL，pH 7.2~7.4。
（二）滅菌移液管、滅菌稀釋水、試管、杜漢氏小管、革蘭氏染色液、滅菌培養皿。
1、自來水取樣：應在水打開放水5min ，再用無菌容器接取水樣，待分析。如水樣內含有余氯，則采樣瓶滅菌后按每500mL水樣加3％Na2S2O3.5H2O溶液1mL。
2、江、河、湖、池自然水體取樣：可用采樣器，采樣瓶應先滅菌。采樣后，瓶內應留有空隙。如果與其他化驗項目聯合取樣，細菌學分析水樣應采在其他樣品之前。
若實驗所測定的15支管中均為陽性反應，說明濃水樣污染嚴重，可將樣品進一步稀釋后，再按上述方法接種、培養和觀察。
將初發酵實驗中產酸產氣的后只產酸或只產氣的試管中的培養物用接種環取少許，劃線接種在品紅亞硫酸鈉培養基或伊紅美藍培養基平板上，為了確保獲得分離的單菌落，須注意以下事項：
（3）先對試管輕擊并使之傾斜，以免接種針挑取到任何膜狀物或浮渣；
（4）劃線時要用針尖的彎曲部分接觸瓊脂培養基平面．以免刮傷或戳破培養基。劃線后培養皿倒置，于37℃培養18～24h。
經上述經染色為革蘭氏陰性的典型菌落，用接種環刮取部分接種于盛有乳糖培養基的試管中，在37℃培養24h，陽性反應者即確認為大腸菌群細菌。
如果初發酵接種水樣量為10mL、1mL、0.1mL，可直接查表求出原水樣100mL中大腸菌群指數（MPN）。如果接種水樣量低于上述水樣量，則經下面的換算式計算。
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