深低溫保藏細胞的解凍
深低溫保藏的細胞十分脆弱,要輕柔操作。快速解凍深低溫保藏
的細胞,然后直接將其接種到*生長培養基中,如果細胞對抗
凍劑(DMSO或甘油)特別敏感,則離心除去抗凍劑,然后將細胞
接種到*生長培養基中。下面是深低溫保藏細胞的建議解凍步
驟:
直接接種法
1.從凍存管中取出細胞,用37℃水浴快速解凍。
2.將細胞直接接種到*生長培養基中。每毫升凍存細胞需要
10-20ml*生長培養基。計算活細胞的個數。細胞接種量至
少要達到3X105 活細胞/ml。
3.將細胞培養12-24h。更換新鮮*生長培養基以去除抗凍劑。
離心法
1.從凍存管中取出細胞,用37℃水浴快速解凍。
2.將1-2ml 凍存細胞接種到大約25ml*生長培養基中。要非常
輕柔地進行混合。
3.用大約80 X g的速度離心2-3分鐘。
4.吸除上清液。
5.用*生長培養基輕輕重懸解離下來的細胞,并計算活細胞的
個數。
6.接種細胞。細胞接種量至少要達到3X105 活細胞/ml。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。