成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗(yàn)機(jī)|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>操作使用>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

公司關(guān)于單細(xì)胞凝膠電泳的操作流程與注意事項(xiàng)的詳細(xì)說明

來源:上海士鋒生物科技有限公司   2013年04月28日 08:45  

1、分離制備單細(xì)胞懸液:

(1)體外培養(yǎng)的細(xì)胞株:用胰酶消化,zui后用PBS懸浮吹打成單細(xì)胞懸液,細(xì)胞要計(jì)數(shù),具體的量我前邊已經(jīng)說過。

(2)體內(nèi)臟器細(xì)胞:處死動物,取出臟器,于Hanks’液中制備成單個細(xì)胞懸液。

2、膠板制備:

(1)取100μl于45℃水浴中保溫的0.5%NMA,鋪于磨沙載玻片上,形成底膠。蓋玻片推勻,不能有氣泡,4度凝固5至8分鐘。

(2)水平取下蓋片,取100μl于37℃水浴中保溫的0.5%LMA與20μl細(xì)胞懸液(約400個細(xì)胞)混勻,立即鋪片,加上蓋玻片,4度凝固5至8分鐘。

3、細(xì)胞裂解與電泳:

(1)將制備好的膠板去掉蓋玻片后,浸于4℃預(yù)冷的細(xì)胞裂解液中,在4℃下裂解2.5到3小時。

(2)取出膠板,用雙蒸水浸沒漂洗后放入電泳槽中,浸泡在4℃預(yù)冷的電泳液中解旋20分鐘。

(3)玻片水平放置陽附近,4℃電泳20到25分鐘(25V,300mA)。可在電泳槽周圍加冰塊以保持低溫。

4、中和與染色:

(1)電泳結(jié)束,將膠板浸泡于中和液中,每次10分鐘,共中和3次,每次要更換中和液。zui后晾干。

(2)取出膠板,置于染色缸中,在2μg/ml的EB染色液中,暗處染色5到10分鐘。

(3)蒸餾水漂洗2次,每次5分鐘。

稍晾干,濾紙吸去多余水分,盡快在熒光顯微鏡下觀察。

單細(xì)胞凝膠電泳的操作流程與注意事項(xiàng)

注意事項(xiàng):

1.細(xì)胞一定要消化成單個的,如果你養(yǎng)的細(xì)胞是懸浮生長的,或者形狀是圓形的(例如hela),那么你可以直接用細(xì)胞刮收細(xì)胞做,否則,如果細(xì)胞是非圓形的,例如成纖維細(xì)胞等,一定要用胰酶消化,使之成圓形,然后才可做實(shí)驗(yàn)。很多做彗星實(shí)驗(yàn)總是出不來結(jié)果的,可以考慮下是否是這方面的原因。

2.電泳時,電流與電壓強(qiáng)度在每次實(shí)驗(yàn)時要恒定(例如:20V,200mA恒定),這樣出來的慧尾才有分析價值,否則你不知道分析因素的差異是由電泳條件的改變引起的還是細(xì)胞處理不同引起的。

3.關(guān)于掉膠的問題:蓋玻片兩面都涂上剝離硅烷(挺便宜的一大瓶,但是有毒),這樣會好很多

4.裂解液是整個實(shí)驗(yàn)中zui關(guān)鍵的因素,裂解液zui終使用時必須是澄清沒有任何沉渣的,如果沒有溶解好是肯定影響實(shí)驗(yàn)的,如果常溫不容易溶解的話可以放入4℃冰箱中一段時間,就比較容易溶解了

小結(jié):本實(shí)驗(yàn)所有操作步驟從膠板制備開始到zui后都應(yīng)該在暗光或者紅光下操作,實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵步驟是凝膠制備,一定要均勻平整無氣泡,此外要避免試驗(yàn)中細(xì)胞裂解液等有毒物質(zhì)對自己的傷害。

免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
主站蜘蛛池模板: 亚洲欧美中日韩中文字幕| 亚洲 欧美 变态 卡通 自拍| 亚洲区激情区图片小说区| 国产亚洲精品久久AV| 亚洲欧美人妻中文字幕| CHINESE老太性视频BBW| 亚洲天堂av一区二区三区| 免费99精品国产人妻自在线| 亚洲最大av资源网| 亚洲一区二区三区四区五区黄| 激情五月婷婷| 香蕉网在线.亚洲精品| 巨黄的长篇肉辣文小说| 亚洲精品久久久久久一区| 国产精品高潮AV久久无码| 亚洲AV永久综合在线观看尤物| 亚洲精品久久无码午夜小说| 亚洲一区二区日韩精品| 久久精品国产亚洲| 亚洲综合AV久久国产精品凡士林| 国产精品久久综合亚洲av| 国产AV熟妇人震精品一品二区| 三个男人躁我一个爽公交车上| 国产午夜视频免费观看| 99精品久久久久久中文字幕| 日韩欧无码一区二区三区免费不卡| 国产精品无码一区二区在线A片| 色婷婷六月亚洲婷婷丁香| 亚洲精品无码久久久久| 国产精品第一国产精品| 亚洲日韩一区二区精品射精| 欧美福利写真一区二区三区| 吃瓜群众图片| 日本韩国欧美在线观看| 久久久久久久久女人体| 国产日韩每日更新| 美女裸露100%奶头视频| 李宗瑞性侵照片全集| 好涨嗯太深了嗯啊用力停| 伦理片琪琪影院免费观| 日韩卡二卡三卡四卡免费入口|