人眼可見(jiàn)的光只占電磁波譜的很小—部分（400~760nm），它是一種頻率較大的電磁波.電磁波按頻率大小,從頻率zui小的無(wú)線電波到頻率zui大的γ-射線排成一列,即組成電磁波的波譜,
   1 分光光度計(jì)的光譜范圍
   包括波長(zhǎng)范圍為400~760 nm的可見(jiàn)光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200～400 nm的紫外光區(qū).不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源.
   鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的400～760nm波長(zhǎng)的光譜,光通過(guò)三棱鏡折射后,可得到由紅,橙,黃,綠,藍(lán),靛,紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見(jiàn)光分光光度計(jì)的光源.
氫燈的發(fā)射光譜:氫燈能發(fā)出185～400 nm波長(zhǎng)的光譜,可作為紫外光光度計(jì)的光源.
     物質(zhì)的吸收光譜（1）    如果在光源和棱鏡之間放上某種物質(zhì)的溶液,此時(shí)在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜,它出現(xiàn)了幾條暗線,即光源發(fā)射光譜中某些波長(zhǎng)的光因溶液吸收而消失,這種被溶液吸收后的光譜稱(chēng)為該溶液的吸收光譜.
不同物質(zhì)的吸收光譜是不同的.因此根據(jù)吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質(zhì). 
    物質(zhì)的吸收光譜（2）    當(dāng)光線通過(guò)某種物質(zhì)的溶液時(shí),透過(guò)的光的強(qiáng)度減弱.因?yàn)橛幸徊糠止庠谌芤旱谋砻娣瓷浠蚍稚?一部分光被組成此溶液的物質(zhì)所吸收,只有一部分光可透過(guò)溶液. 入射光 = （分光度計(jì)）反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透過(guò)光。如果我們用蒸餾水（或組成此溶液的溶劑）作為"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的損失,則: 入射光 = 吸收光 十 透過(guò)光 
    物質(zhì)吸光度（A）與透射比（T）的關(guān)系
    設(shè) I0 為經(jīng)過(guò)空白校正后入射光的強(qiáng)度;I 為透過(guò)光的強(qiáng)度. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)得知 I = I0 ?10-εc l
式中,c 表示吸收物質(zhì)的摩爾濃度;l 表示吸收物質(zhì)的光徑,用cm表示;ε表示吸收物質(zhì)的摩爾消光系數(shù),它表示物質(zhì)對(duì)光的吸收特性,不同物質(zhì)的ε數(shù)值不同. 所以 I / I0 = 10-εc l  令 T（透射比） = I / I 0 T = 10-εcl  若以T對(duì)吸收物質(zhì)的濃度作圖,則得圖1-5-2中的曲線. 由上式可得 1g（1 / T） = εc l  。lg（l / T）為物質(zhì)的吸光度（A） A = 1g（1 / T） 
     Lambert -Beer定律（ E = εc l）
     上式說(shuō)明了物質(zhì)的吸光度與吸收物質(zhì)的濃度和液層的厚度成正比,這就是光吸收的基本定律--Lambert-Beer（朗伯-比耳）定律.