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QuEChERS 結合 UHPLC-MS/MS 技術分析土壤中的 59 種抗生素

來源:安捷倫科技(中國)有限公司   2025年07月22日 18:14  

抗生素是用于細菌感染的藥物,廣泛應用于人和動物的疾病預防和治療,30%–90% 會通過排泄糞便和尿液的形式進入土壤、沉積物和水體環境中,不斷富集,直接或間接地影響人類的健康。


 

本方法使用 QuEChERS 基質分散固相萃取凈化并結合 Agilent 6475 QQQ 三重四極桿液質聯用系統(LC-MS/MS),同時檢測土壤中 59 種抗生素殘留。該方法使用基質外標法進行定量,具有出色的靈敏度,目標化合物的線性相關系數(R2)均高于 0.99;目標化合物的回收率均在 60%–120% 之間,且所有化合物回收率的 RSD 均小于 20%,表現出良好的準確度和精密度。適用于土壤中抗生素多殘留的定量分析。

 

實驗部分


圖片

儀器:Agilent 1290 Infinity II 超高效液相色譜/6475 QQQ 三重串聯四極桿液質聯用系統

色譜柱:Agilent Poroshell 120 EC-C18(100 mm×3.0 mm,2.7 µm;部件號 695975-302)

樣品前處理:Agilent Bond Elut QuEChERS 基質分散凈化試劑盒(部件號 5982-4956)、Agilent Captiva RC(再生纖維素)微孔濾膜(0.2 μm,15 mm;部件號 5190-5108)以及 Agilent 陶瓷均質子(用于 50 mL 離心管;部件號 5982-9313)

標準品和緩沖液制備

取適量抗生素標準品,以甲醇為溶劑配制得到濃度為 10 µg/mL 的混合標準儲備液,冷藏于 –20 °C 冰箱中。磷酸鹽緩沖液:稱取 27.2 g 磷酸二氫鉀溶于 1 L 水中,向其中加入 1.35 mL 磷酸,混勻后備用。

樣品前處理流程

圖片

圖 1. 土壤中 59 種抗生素的前處理操作流程

色譜條件

色譜柱:Poroshell 120 EC-C18(100 mm×3.0 mm,2.7 µm)

流速:0.4 mL/min

柱溫:40 °C

進樣量:2 µL

流動相:A:0.1% 甲酸水;B:甲醇

洗脫程序:


時間(min)

B%

0.0

10

1.5

10

5.0

40

7.1

90

8.0

90

8.1

98

10.0

98

后運行時間:3 min

質譜條件

離子源模式:ESI 正/負離子掃描

干燥氣溫度:280 °C

干燥氣流速:8 L/min

鞘氣溫度:350 °C

鞘氣流速:12 L/min

霧化氣壓力:35 psi

毛細管電壓:3500 V(+)/2500 V(-)

掃描模式:dMRM

 


 

結果與討論


加標回收率和精密度

表 1. 土壤中 59 種抗生素的加標回收實驗結果(n=6)

圖片

注:* 表示該化合物在空白中的檢出量較高,導致回收率和 RSD 計算存在較大偏差;-表示該濃度并非定量限,不計算回收率。

 



 

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