使用二氧化碳搖床(CO?搖床)時,需注意以下關鍵事項以確保實驗安全、設備穩定及細胞培養效果:
1. 安全操作
氣體安全:
確認CO?氣瓶固定牢固,連接管路無泄漏(可用肥皂水檢測)。
避免CO?濃度過高(通常維持5% 10%),防止人員窒息或培養環境失衡。
實驗室需通風良好,必要時安裝CO?監測報警器。
電氣安全:
檢查電源電壓與設備匹配,接地可靠。
避免液體濺入設備內部,防止短路。
2. 設備準備與校準
滅菌與清潔:
使用前用70%乙醇或專用消毒劑擦拭內腔,紫外照射(如有)30分鐘以上。
定期清理水盤(濕度控制型),防止微生物污染。
校準與驗證:
定期校準CO?傳感器(建議每6個月一次),確保濃度準確。
驗證溫度均勻性(±0.5℃以內)和搖床轉速穩定性。
3. 參數設置
培養條件:
典型設置:37℃、5% CO?(哺乳動物細胞),根據細胞類型調整。
濕度控制:保持≥95%濕度(開放式培養皿需加水盤或濕度模塊)。
搖床參數:
轉速范圍:通常30 300 rpm,避免過高轉速導致細胞損傷或液體飛濺。
振幅選擇:根據容器類型(如培養瓶、孔板)調整擺動幅度。
4. 使用中的注意事項
樣品擺放:
均勻分布負載,避免偏心放置導致不平衡或噪音。
容器密封性檢查(如擰緊瓶蓋),防止培養基蒸發或污染。
實時監控:
記錄運行參數(溫度、CO?、轉速),觀察設備是否異常(噪音、報警)。
*次運行或更換條件時,建議每隔幾小時確認環境穩定性。
5. 維護與故障處理
日常維護:
每周檢查CO?管路、過濾器是否堵塞,水盤是否清潔。
長期停用時排空水盤,關閉氣源并斷電。
常見問題:
CO?濃度不穩定:檢查氣瓶壓力、傳感器或管路漏氣。
溫度波動:確認門密封性,或校準溫度探頭。
如遇持續報警,立即聯系廠家技術支持。
6. 其他提示
節能建議:夜間可調低轉速或溫度(如25℃),但需確保細胞耐受。
兼容性:確認培養容器材質(如PETG瓶)耐CO?滲透,避免pH漂移。
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