如何選擇適合研究的肝細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒?原代 vs 永生化細(xì)胞系
選擇適合研究的肝細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒需基于實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)、周期及成本綜合考量,原代細(xì)胞與永生化細(xì)胞系各有核心優(yōu)勢(shì):
原代肝細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(如IPHASE兩步膠原酶灌流法試劑盒)適合藥物代謝、毒性評(píng)估等高真實(shí)性需求場(chǎng)景。其核心優(yōu)勢(shì)在于:
功能保真性:試劑盒通過(guò)優(yōu)化膠原酶濃度與灌注流程,分離的細(xì)胞存活率超90%,且維持CYP450酶、II相代謝酶等正常生理濃度,可精準(zhǔn)模擬體內(nèi)代謝環(huán)境。例如,Takara的CellartisPowerPrimaryHEPMedium支持原代肝細(xì)胞培養(yǎng)14天以上,仍保持尿素合成、藥物轉(zhuǎn)運(yùn)等功能。
短期實(shí)驗(yàn)經(jīng)濟(jì)性:?jiǎn)未螌?shí)驗(yàn)成本低,試劑盒提供即用型灌流液、純化液等,24孔板可重復(fù)使用400次,適合短期藥物篩選或機(jī)制研究。
倫理與成本優(yōu)勢(shì):避免動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理爭(zhēng)議,且成本僅為動(dòng)物模型的1/3,符合3R原則。
永生化肝細(xì)胞系試劑盒(如SV40T或hTERT介導(dǎo)的永生化試劑盒)適合長(zhǎng)期傳代、高通量篩選等場(chǎng)景。其核心優(yōu)勢(shì)在于:
增殖穩(wěn)定性:通過(guò)導(dǎo)入永生化基因(如SV40T抗原),細(xì)胞可傳代50代以上,群體倍增時(shí)間縮短至28小時(shí),解決原代細(xì)胞體外增殖受限問(wèn)題。例如,永生化胎肝細(xì)胞系IMF-Hep的ALB與CYP3A4表達(dá)量達(dá)原代細(xì)胞的85%,且30代內(nèi)核型穩(wěn)定。
功能可調(diào)控性:部分試劑盒支持iPS細(xì)胞向肝細(xì)胞定向分化,獲得功能成熟的肝細(xì)胞,適用于肝臟發(fā)育或疾病模型研究。
長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)成本效益:雖初始成本較高,但長(zhǎng)期使用可大幅降低單次實(shí)驗(yàn)成本,適合需要反復(fù)傳代的實(shí)驗(yàn)。
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