羅丹明123 (Rhodamine 123、羅丹明123, Rh 123)是一種常用的陽離子綠色熒光染料,可以透過細胞膜從而在活細胞線粒體內(nèi)聚集,并發(fā)出黃綠色熒光。廣泛用作檢測線粒體膜電位的熒光探針,并且對細胞沒有任何毒性。
溶解性:溶于乙醇,參考濃度1mg/ml。
溶液的配制
用DMSO溶解,終濃度為1-5 mM。溶液分裝,避光保存于-20 oC。
羅丹明123使用方法
1. 用載玻片準備細胞。細胞數(shù)目應(yīng)為 5×104~5×105個/mL。
2. 孵育該載玻片,用 PBS或Hank’s 液洗滌細胞。
3. 用培養(yǎng)基稀釋 Rh123母液以制備 1~20µM Rh123緩沖液。具體工作濃度取決于細胞類型和細胞濃度。
4. 將 Rh123緩沖液加入載玻片并在37℃下孵育 30 分鐘至 1 小時。
5. 去除 Rh123 緩沖液并用培養(yǎng)基洗滌細胞(洗滌細胞后為了固定,加入 10%福爾馬林緩沖液并孵育 15~20 分鐘,接著用 PBS洗滌)。
6. 用帶有熒光素濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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