1、現行的沉降菌和浮游菌除了采樣方法不同，其他意義何在？

答：沉降菌和浮游菌都是空氣微生物，但是它們代表的意義不同，沉降菌是沒有辦法時候的選擇，就等于說你沒有相關的儀器設備，你只能用沉降菌的方法來做，但是沉降菌只是大顆粒，容易掉下來的，不能代表真實的空氣中微生物的數量，而浮游菌相對來說是更能直接表達空氣的衛生污染程度的，它們兩個是不太一樣的。

2、老師購買的一次性帶包裝的培養皿可以在無菌室或培養室暫存嗎？

答：如果你買的商品化的培養基帶包裝的培養皿，可以放在無菌室暫存，但是這個保存期就要縮短。一般來說，商品化的一次性培養基都是需要避光冷藏保存的，在避光冷藏保存下，一般規定了保質期。但是你如果放在無菌室，短時間可以，但是它的保存期就難以估計了，另外還有光，光照對培養基也是有影響的。你可以暫存，暫存是可以的。

3、如果在無菌室外暫存進無菌室還需要通過傳遞窗紫外殺菌嗎？

答：一般不需要，因為是這樣，培養基是包裝好的，進了無菌室直接把包裝拆掉，它外包裝上的污染就沒有了。通過傳遞窗紫外燈殺菌，紫外線只能照到上面，又不能穿透，又不能拐彎，所以紫外燈的殺菌范圍、面積都是很有限的，并不能真正解決外包裝物上面有污染這個問題。

4、車間和無菌室的環境采樣多長時間測一次？

答：GB/T 27405-2008有規定，27405的附錄是規定無菌室每兩周做一次，有標準依據。

5、生產環境監控中，涂抹手，設備表面地面墻面等的面積，方法，以及判定標準？

答：生產環境監控一般來說是按照GB 14881-2013這個標準的系列——良好生產工藝規范來規定。但不是每一種食品類別的生產環境都是有明確規定的，像包裝飲用水GB 19306-2018就有明確規定的，每只手該怎么樣等都是有規定的，但是多數類別是沒有標準規定的，因為不同的商品生產是有不同的面積要求限值的，這個沒法一刀切。

6、老師聽過上次您有關沉降菌的課，有個疑惑GB 50591-2010里面培養皿放置在地面及其以上0.8m之內的任意高度，16294的0.8-1.5m哪個檢測出來的結果更具有說服力？

答：關于沉降菌，我們檢查的是你正常操作的高度上到底有沒有微生物污染。所以，如果你操作臺面是0.8m高度或者包裝飲用水灌裝是1.5m高度，那你覺得在生產線的哪個地方哪個高度需要檢微生物？我覺得目前沒有一個生產企業是需要檢地面上的，培養皿放地面上暴露，在地面上的高度沒有人在這位置進行生產操作的，所以這個位置的微生物污染對我們是可以忽視的。因為層流送風一般是從上往下吹，那么吹到地面上是最臟的時候，你檢那個地方有什么意思呢？沒有任何意義，我們只要檢我們的正常操作高度，就是正常高度0.8-1.5m之間哪個位置有用，當然你說你在2m的高度操作也可以，或者你說我在0.5m的高度操作，這個也是允許的，但是你在地面上檢驗，沒有什么說服力，我覺得基本上沒有需求。

7、老師好，有沒有環境存在新冠病毒檢測方面的研究，我們正在做疫情防控，想了解一下，我們的門把手、桌面是否含有新冠病毒，含有的可能性多大？謝謝。防控工作中我們負責采集樣本。

答：講課的時候講到過，北京疾控昨天還是前天公布的就是他們做了門把手等，都沒有新冠病毒，做了很多份，所以一般來說你不需要在做了。即使有這個病毒，有患者接觸過這個門把手，過一會這個病毒也是死掉了，你檢出來的新冠病毒核酸也不是活的病毒，沒有什么感染性。那如果說你一定要檢，你可以按照衛生部的新冠病毒防控手冊第七版看看。

8、氮氣，無菌氣，如何取樣？

答：你可以把氮氣接個管子通到采樣器上，或者把氮氣直接對著空白的TSA瓊脂平板直接吹，就讓它撞擊撞到瓊脂表面上去。同樣的，你需要選擇一個定量的流量（升）或者說是每立方米數，吹了一立方米，然后你再培養來計數這個樣品。

9、員工手部和工器具設備檢測有標準嗎？

答：有的，員工手部和工器具設備檢驗，最直接的標準依據是衛生部的《消毒技術規范》。

10、兩蟲檢測需要哪些設備設施

答：兩蟲檢測有半自動的和全自動的，包括了富集裝置濃縮和檢測系統，全自動的價格在一百萬左右波動，不建議買，半自動的是10幾萬到30幾萬之間吧。

11、老師，請問一下生活飲用水做微生物如果超過4h檢測，或者隔天檢測，是不是時間越長會導致一部分微生物死亡而不是增長呢？

答：不好說，生活飲用水如果你放了超過4 h檢測或者隔天檢測，不能確定微生物就是死亡還是繁殖了，比如說生活用水中有銅綠假單胞菌，這種菌能夠利用很少很少，哪怕塑料包裝瓶上一點點塑料的溶出物，都可以繁殖，所以說隔天有可能綠膿會越長越多。

12、霉菌培養箱的霉菌怎么處理？

答：平時的就是先噴一些酒精殺菌，然后揮發干了以后你測一下，如果還是不行的話，培養箱里面如果有電源插座的話，也可以加一盞紫外燈。在里面，它會產生一些臭氧，也能夠殺死一些表面的微生物。如果嚴重污染的情況，建議用甲醛熏蒸，甲醛對培養箱沒有任何的腐蝕作用，反正悶在里面。使用乳酸、二氧化硫之類，對設備腐蝕性太強。

13、拌面醬微生物檢測前是否需要進行前處理，因為含有液態食用植物油的情況，是否需要用石蠟進行預處理呢？

答：感覺你這個是復合調味料，我覺得你不要加液體石蠟，而是應該加吐溫80，加吐溫80然后全部去均質，因為吐溫80能讓植物油乳化，就像做奶油檢驗一樣。如果你覺得目前沒法想象具體如何操作，就可以參照GB 4789.18-2010奶油的檢驗方法，按照奶油的方法來做，沒問題。

14、老師上次講沉降菌，采樣后由于運輸時間長，放在當地其他實驗室里培養，請問這樣處理的話儀器質量控制方面怎么寫？

答：儀器質量控制記錄為當地的培養箱。因為我們在當地的疾控中心的實驗室也是通過實驗室資質認定的，也是通過國家實驗室認可的，這樣的情況就相當于我們租用他們的實驗室儀器設備，把合同寫清楚就好了。他們肯定有相應的質量控制，我們只要能夠保證溯源，能夠查到就可以了。

15、加標一般理化會這樣執行，微生物一般一次做完可以這樣理解嗎？

答：你就是平行采兩份，看它們之間的偏差，比如說我到現場采了兩份生活用水，一份作為檢驗樣，一份作為平行樣，如果兩份樣品數值差了很多就不對了。但是，具體差多少算為不合格，那要實驗室自己定，只是說現在這個標準規定你要這么做，只是沒有說要怎么判定。理化有規定偏差多少以上判定不合格，但是微生物沒有具體的規定，要怎么判定還是要實驗室自己規定。

16、請問老師：1）關于生產車間表面微生物取樣和檢測的相關標準都有哪些？2）對于車間地面采樣點如何布置，最少需要幾個取樣點？3）如需要檢測致病菌（如沙門氏菌），取樣點和取樣量該怎么布置？

答：1）生產車間的表面取樣按照GB 14881系列標準食品生產衛生規范。有的標準GB 19306 包裝飲用水的是有明確規定的，大多數的產品沒有具體規定，不同的食品種類是不一樣的，具體的還要等修訂。2）不要做地面，因為沒人在地面上做生產，只需要做0.8-1.5 m的操作面積高度上。標準規定的很明確，可以自己定。3）一般生產車間表面是不需要檢沙門氏菌的，應該檢驗簡單的常規指示菌如菌落總數或者大腸菌群或者腸桿菌科就可以了。如果沒有大腸桿菌或者說腸桿菌科，沙門氏菌也不可能存在的。單純的檢一個目標菌意義不大，你也不能保證其他的致病菌就不存在。

17、老師，硫代硫酸鈉可以采完樣后再添加呢？

答：必須是采樣完再添加。只有知道現場檢測后才知道是否有余氯，才能添加。不能高壓滅菌前添加在采樣容器里面。

18、皿為單位是多長時間？

答：要根據具體執行的標準。有的五分鐘，有的半小時，有的四小時，甚至有的可以連續暴露過夜。

19、老師，請問一下，做空氣微生物，如果平板都是沒有長菌，結果應該報0，小于1還是未檢出呢？

答：都可以，空氣微生物的檢驗方法標準都比較粗，并沒有規定怎么報告。一般都需要實驗室自行規定，建立自己實驗室的作業指導書。

20、那平板平均值如果是0.8，那結果報多少？可以直接寫0.8還是1？

答：不好說，自己規定。還是需要實驗室有作業指導書來統一規定怎么做。但是需要注意避免因為修約把0.8變成1導致判定為不合格的情況——國外機構要求百級潔凈度都是＜1，我國可能是允許≤1。這時候，明明是0.8判為合格，被你修約后報告1，可能就變成不合格結果了。

21、搭皿蓋這樣是錯誤的，那怎樣是對的？

答：建議聽上一期的GB/T 16294的課程。的辦法是帶一些滅菌的報紙去現場，鋪在桌面上，把平皿放在上面，平皿蓋也直接放在上面，沒有污染的問題，而且報紙可以防止桌面上的灰塵飄起來到平皿里。

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