N6 - 甲基腺苷（m6A）是真核生物中 RNA 分子上最常見且豐富的修飾。在多細胞真核生物中也發現了 DNA 上的 m6A，包括秀麗隱桿線蟲和黑腹果蠅，此外在高等真核生物中也發現了，包括植物、小鼠和人類細胞。m6A 在調控 DNA 復制、轉座、轉錄和細胞防御中起著至關重要的作用。在人類中，DNA 上的 m6A 修飾很可能是由甲基轉移酶復合體 METTL3 催化生成的，并且可被 α - 酮戊二酸（α - KG）和 Fe2 + 依賴的雙加氧酶（如 ALKBH5 和 TET 類似酶）去除。研究表明，METTL3 和 α - KG/Fe2 + 依賴的雙加氧酶在許多生物學過程中發揮著重要作用，從發育和代謝到生育能力都有涉及。DNA 上動態且可逆的化學 m6A 修飾也可能作為一種具有深遠生物學意義的新型表觀遺傳標記。在人類癌細胞和組織中，m6A 修飾的下調s次被描述，與它們的正常對照相比。m6A 被發現是癌癥中調控最多的 DNA 修飾。除了在癌細胞中的調控外，與含有相當低量 DNA m6A（< 0.001%）的原代細胞 / 組織相比，在體外培養的人類細胞中發現了 m6A 修飾的百倍增加（0.03% - 0.22%）。因此，識別 DNA 上的 m6A DNA 甲基化水平和分布可以推進對基因組水平上生物學過程表觀遺傳調控的理解，并為進一步改善疾病診斷和治療提供有用的信息。

MethylFlash™ m6A DNA 甲基化 ELISA 試劑盒（比色法）是一套經過優化的緩沖液和試劑，用于比色法定量檢測 DNA 中的 N6 - 甲基腺苷（m6A 或 6mA）。該試劑盒適用于直接檢測從任何物種（如哺乳動物、植物、真菌、細菌和病毒）中分離的 DNA 的 m6A DNA 甲基化狀態。

艾美捷MethyFlash m6A DNA甲基化ELISA試劑盒（比色法）（#P-9010-48）優勢與特點：

1、比色法檢測，操作步驟簡便，方便快捷。整個操作流程可在 3 小時 45 分鐘內完成。

2、高靈敏度，檢測限可低至 5 pg 的 m6A。

3、特別的結合溶液可使長度大于 100 個核苷酸的 DNA 緊密結合到孔中，從而能夠對完整 DNA 或片段化 DNA（如 ChIPed DNA）中的 m6A 進行定量。

4、優化的抗體和增強溶液對 m6A 具有高特異性，在樣本 DNA 的指定濃度范圍內，對未甲基化的腺苷無交叉反應。

5、包含通用的正負對照，適用于定量任何物種的 m6A。

6、條帶式微孔板格式使檢測既適用于手動操作，也適用于高通量分析。

7、簡單、可靠且一致的檢測條件。

原理與操作流程：

該試劑盒包含用于定量檢測 DNA 中 m6A 的所有試劑。在該檢測中，使用 DNA 高結合溶液將 DNA 結合到條帶孔中。利用捕獲和檢測抗體檢測 m6A。增強檢測信號，然后通過在微孔板分光光度計中讀取吸光度來比色法定量。m6A 的含量與測得的 OD 強度成正比。

左圖：將不同濃度的 m6A 標準對照品加入到檢測孔中，然后使用 EpiQuik™ m6A DNA 甲基化 ELISA 試劑盒（比色法）進行測量。

右圖：使用 MethylFlash™ m6A DNA 甲基化 ELISA 試劑盒（比色法）定量檢測各種人類 DNA 樣本中的 m6A 含量。