LabChip® GX Touch™核酸分析儀采用微流控毛細管電泳分離技術可以快速完成DNA和RNA的核酸片段大小及濃度檢測,生成可重復的高分辨率數據。并且,采用便捷的觸摸屏操作界面,即使新手,也能快速進行準備工作和樣品運行,簡化了傳統電泳過程的諸多繁瑣步驟。

一、工作原理
LabChip GX Touch檢測試劑盒基于傳統的凝膠電泳原理,這些原理已轉換為芯片形式。芯片格式大大縮短了分離時間,并以數字格式提供自動定量信息。

該芯片包含一組互連的微通道,這些微通道連接分離通道和緩沖孔。其中一個微通道連接到一個短毛細管,該毛細管以90°角從芯片底部延伸。在測定過程中,毛細管從微孔板的孔中吸取樣品。

芯片中的某些通道比其他通道大。較大的通道包含緩沖區。在芯片制備過程中,較小的通道和一些孔中填充有篩分凝膠和緩沖液。通道填滿后,芯片起到集成電路的作用。

該電路由電極塊中的七個電極驅動,當前門關閉時,這些電極與芯片孔中的溶液接觸。每個電極都連接到一個獨立的電源,可提供最大的控制和靈活性。

填充芯片中較小通道的聚合物設計用于在通過電泳驅動DNA/RNA片段或蛋白質通過其時按大小篩選DNA/RNA片段或蛋白質,類似于使用瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠。

樣品和篩分緩沖液還含有熒光染料,在與雙鏈 DNA、RNA 或蛋白質/SDS復合物結合后會變得更亮。

在芯片中,通過負壓從微孔板中抽取每個樣品,直到將足夠數量的樣品加載到芯片中。然后將樣品電泳移動到中央通道中。當片段沿著中心通道向下移動時,它們按大小分離,然后通過激光,激光激發與分子結合的熒光染料。該軟件繪制熒光強度隨時間的關系圖,并為每個樣品生成電泳圖。

可以在凝膠選項卡上以凝膠狀格式查看數據,以實現平板凝膠的外觀。(凝膠的顏色可以改變。

對于DNA、RNA、蛋白質和聚糖測定,定量濃度和準確定量每個片段的大小是通過ladder和內標確定各條帶的大小和濃度。
吸入芯片的樣品量取決于pH值、鹽濃度和緩沖液添加劑。內部標準對這些因子進行歸一化,以便軟件可以使用標準品曲線面積與未知峰的比值直接確定濃度。
在各樣品分析之間清洗吸管,從而消除了交叉污染或殘留。
二、儀器描述
1、儀器前視圖

1)Touch Screen
觸摸屏:顯示控制儀器的軟件。
2)Power Button
電源按鈕:打開儀器和觸摸屏。儀器開啟時亮起。要關閉儀器,請在Windows桌面上選擇“開始”-->“關機”以關閉軟件。使用電源按鈕關閉儀器可能會導致文件損壞。僅在緊急情況下或計算機已鎖定時使用。
3)Status Indicator Lights
狀態指示燈:指示儀器狀態。
未亮-電源關閉。
綠色常亮-電源已打開,GX Touch 軟件處于活動狀態,但儀器處于空閑狀態。
綠色閃爍-運行檢測或Protein Clear HR/Protein EXact校準。
黃色常亮-電源已打開,但GX Touch軟件未在Windows中運行。
紅色常亮-電源已打開,GX Touch軟件處于活動狀態,但無法與儀器通信。
紅色閃爍-儀器無法執行LabChip GX Touch軟件發出的操作。
4)Front Door
使用LabChip GX Touch軟件打開前門。當門打開時,會顯示一條消息,提醒用戶執行適當的操作。
2、連接接口
1)電源

2)側面連接器
側面連接器用于將外圍設備(如鼠標、鍵盤或外部顯示器)連接到LabChip GX Touch/GXII Touch儀器,并將儀器連接到網絡。

VGA Monitor Port:VGA 顯示器端口,用于將儀器連接到外部顯示器。
3、DNA, RNA, and Protein Chips
1)Top of Chip

2)Bottom of Chip

3)芯片接口

芯片接口固定芯片,為芯片通道提供電壓以加載、進樣和分離樣品,提供壓力以用分離凝膠灌注芯片,并為芯片孔提供真空以將樣品從微孔板吸入芯片。芯片接口還包含一個加熱元件,用于在芯片的微流控通道中保持恒定溫度,并提供光學黑光束轉儲,以提高靈敏度并幫助熒光檢測。

Lid:固定電極和O形圈以提供電壓和對芯片施加壓力。
Optics lens:用于激光照亮芯片的透鏡。
Optical Beam Dump:在芯片下方提供光學暗背景。
Pressure Plate with Heating Element:在芯片的微流控通道中保持恒定的溫度。
Electrodes:向芯片施加電壓,使流體通過芯片,并驅動芯片通道中的電泳分離。
O-Rings:在芯片接口蓋和芯片之間建立密封,以對孔施加壓力或真空。
Pressure Port:提供壓力(正壓或負壓)以灌注芯片或將樣品移過芯片。
4)核酸Chips

5)蛋白Chips

4、微孔板載體

三、軟件介紹
1、LabChip GX Touch主窗口

1)Views
“視圖”按鈕 - 打開“視圖”窗口以查看上次完成運行的數據。使用LabChip GX Reviewer軟件查看或分析先前運行的數據。
2)Prime and Calibrate Window

Change Assay Folder:更改檢測文件夾按鈕,輕觸以選擇包含所需檢測的文件夾。
Prime and Calibrate:啟動和校準按鈕,開始校準過程。
2、Run Window
1)Select Wells Tab

Import Run File:“導入運行文件”按鈕,打開“從XML文件導入運行參數”窗口以選擇要導入的運行文件。
2)Setup Run Tab

Skip Warm:跳過熱,僅顯示 Protein EXact 芯片在運行前已預熱的情況。如果選擇此選項,則不會重復預熱過程。
3)Start Run Tab

Chip Status:芯片狀態,顯示檢測類型、芯片試劑過期時間、芯片過期日期和芯片壽命。
4)Status Window

使用“狀態”窗口可在操作運行期間或操作完成后查看啟動、儀器校準、清洗或運行的狀態。
Assay:儀器將要校準的檢測的名稱。
Status:狀態,正在進行的操作的當前步驟。對于已完成的操作,顯示上次操作的狀態。
3、Tools Window

使用“工具”窗口指定數據導出設置、查看或添加孔板、運行軟件IQ、運行診斷以及校準光學元件。
4、Views Window

使用“視圖”窗口可以查看正在進行的運行或校準中已完成的樣本孔的數據,或以前已完成的運行或校準。可以在GX Touch軟件中查看數據并更改某些分析設置。
1)Egram/Gel Tab

在孔完成后,使用 EGram/Gel 選項卡查看分析孔數據的電泳圖和凝膠。
2)EGram Tab

EGram選項卡是每個孔數據的可視化表示。
3)Gel Tab

四、樣本檢測
1、準備儀器以運行樣本
1)打開LabChip GX Touch軟件。
2)清潔電極和O形環。
3)吹掃壓力管線。
4)如有必要,校準光學器件并運行診斷程序。
5)準備用于檢測的芯片。
6)將芯片插入儀器。
7)對于蛋白質清除"HR芯片,校準儀器以運行蛋白清晰HR測定(見第26頁)。
8)如有需要,在運行開始前對芯片進行預處理(不適用于Protein Clear HR芯片)。
9)為檢測準備樣品板、梯子和緩沖器。如果您的儀器配備了條形碼閱讀器,請“在板上放置條形碼”以便在樣品板上使用條形碼。
10)如果需要,定義一個新的板類型,以使用軟件中列出的板以外的板。
11)將樣品板、梯子管和緩沖管裝入儀器中。
2、運行檢測
1)完成準備儀器以運行樣品部分中的步驟。
2)定義分析運行的參數。
3)監控運行。
4)如果需要,請在運行期間編輯分析參數。
5)拆下平板、緩沖管和梯子管。
6)卸下芯片,根據分析用戶指南中的說明存儲芯片。
7)如有必要,在再次運行芯片之前立即清洗芯片。
3、數據分析
1)RNA分析
LabChip Touch平臺提供了易于理解的RNA濃度以及核糖體RNA的比例,與RNA質量評分(RQS)共同用作完整性評價指標

除RQS值外,分析軟件現在可以自動計算DV200 值。
2)基因組DNA樣品
為Labchip GX Touch系統開發的基因組DNA實驗創新性的引入了基因組DNA質量評分(GQS)。

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