EpiQuik™循環(huán)乙酰化組蛋白H3K9 ELISA試劑盒（比色法）是專為定量檢測(cè)血漿和血清中的循環(huán)組蛋白H3K9ac而設(shè)計(jì)的。  

艾美捷EpiQuik循環(huán)乙酰組蛋白 H3K9 ELISA試劑盒（比色法）（#P-3132-48）優(yōu)勢(shì)與特點(diǎn)：

1、快速高效的實(shí)驗(yàn)流程，可在2.5小時(shí)內(nèi)完成。

2、高靈敏度和特異性。檢測(cè)限低至0.5 ng/孔，在血漿/血清中指示量范圍內(nèi)的動(dòng)態(tài)范圍為1-20 ng/孔。僅識(shí)別H3K9ac，與未修飾的H3或其他同一賴氨酸位點(diǎn)的修飾物無交叉反應(yīng)。

3、方便地包含對(duì)照用于H3K9ac的定量。

4、條帶微孔板格式使實(shí)驗(yàn)靈活：可手動(dòng)或高通量操作。

5、簡(jiǎn)單、可靠且一致的實(shí)驗(yàn)條件。  

原理與操作流程：

EpiQuik™循環(huán)乙酰化組蛋白H3K9 ELISA試劑盒（比色法）是用于測(cè)量血漿或血清中總H3K9ac的。在使用該試劑盒的實(shí)驗(yàn)中，血漿/血清樣本中乙酰化于K9的組蛋白H3蛋白被涂有抗H3K9ac抗體的條帶孔捕獲。捕獲的H3K9ac蛋白隨后可被檢測(cè)抗體識(shí)別，并通過比色顯色試劑進(jìn)行顯色。H3K9ac的比例與吸光強(qiáng)度成正比。通過與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照比較，可以定量H3K9ac的絕對(duì)量。

EpiQuik™循環(huán)乙酰化組蛋白H3K9 ELISA試劑盒（比色法）的示意圖

工作緩沖液和溶液的準(zhǔn)備：

a. 準(zhǔn)備稀釋的WB（1倍洗液）：

48次檢測(cè)試劑盒：將13毫升的WB（10倍洗液）加入117毫升的蒸餾水中，并將pH值調(diào)整至7.2-7.5。

96次檢測(cè)試劑盒：將26毫升的WB（10倍洗液）加入234毫升的蒸餾水中，并將pH值調(diào)整至7.2-7.5。

此稀釋的WB（1倍洗液）現(xiàn)在可以在4℃下保存長(zhǎng)達(dá)六個(gè)月。

b. 準(zhǔn)備稀釋的DAb溶液：

用稀釋的WB（1倍洗液）按1:1000的比例稀釋DAb（即，將1微升的DAb加入1000微升的稀釋WB中）。每個(gè)檢測(cè)孔需要50微升的稀釋DAb。

c. 準(zhǔn)備稀釋的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照：

建議的標(biāo)準(zhǔn)曲線制備方法：首先，通過將5微升的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照加入5微升的HAB（組蛋白檢測(cè)緩沖液）中，稀釋標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照至50納克/微升；再通過將1微升的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照加入19微升的HAB中，稀釋至5納克/微升。然后，利用5納克/微升和50納克/微升的稀釋標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照與HAB進(jìn)一步配制出七種濃度，最終濃度分別為0.5、1、2、5、10、20和50納克。