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紫外可見分光光度計基于物質分子對紫外-可見光的選擇性吸收特性，通過測量吸光度實現物質的定性與定量分析。其核心原理遵循朗伯-比爾定律（A=εbc），即吸光度（A）與溶液濃度（c）、光程長度（b）及摩爾吸光系數（ε）成正比。當特定波長的光通過溶液時，分子吸收光子能量引發電子能級躍遷，導致透射光強度衰減，通過檢測衰減程度可推算物質濃度。
光路系統由五大核心模塊構成：
光源系統：采用雙光源設計，紫外區（180-370nm）使用氘燈，通過電弧放電激發氘分子產生連續光譜；可見光區（350-1000nm）采用鎢燈或鹵鎢燈，利用熱輻射原理發射連續光譜。兩者通過光源鏡切換實現波長無縫覆蓋。
單色器系統：以Czerny-Turner型光柵單色器為核心，通過入射狹縫聚焦復合光，經反射鏡準直后由光柵衍射分光，再通過出射狹縫篩選目標波長。現代儀器配備可調狹縫（0.2-4.0nm帶寬），結合濾光輪實現紫外/可見/近紅外波段快速切換。
樣品室系統：采用雙光束設計，通過雙斬波器將單色光分為樣品光與參比光，同步照射至比色皿。比色皿材質依波長區分：石英材質用于紫外區（透光率≥80%@200nm），玻璃材質用于可見光區，確保光路垂直性以減少反射損失。
檢測器系統：常用光電倍增管（PMT）或硅光電二極管，將透射光強度轉換為電信號。PMT通過二次電子發射實現高靈敏度檢測（可達10??電流），適用于弱光信號測量。
信號處理系統：集成微處理器與模數轉換模塊，將電信號放大、濾波后轉換為數字信號，通過顯示終端輸出吸光度、透射率及光譜曲線。現代儀器支持多波長同步掃描與數據存儲功能。
技術演進方向：雙光束系統通過動態校準消除光源波動干擾，結合二極管陣列檢測器實現全波長同步采集，使掃描速度提升至毫秒級。例如，Cary100型儀器通過優化光柵偏轉驅動與狹縫調節機構，將波長重復性誤差控制在±0.1nm以內，顯著提升定量分析精度。
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