組織培養中的常用器皿
培養皿是常用的實驗耗材,在組織培養工作中,器工具,其使用量極大。若采用玻璃系統,通常需準備三套培養器皿以滿足循環使用需求:一套正在使用,一套處于刷洗處理階段,另一套經消毒后貯存備用。目前,組織培養常用的器皿主要分為玻璃瓶皿和塑料瓶皿兩大類。
玻璃瓶皿
組織培養所用的各種玻璃器皿,需選擇透明度好、無毒的中性硬質玻璃制成,常用的有以下幾種:
玻璃瓶
主要用于配制和儲存各種培養液、血清等液體,通常可采用 500 毫升、250 毫升、100 毫升的生理鹽水瓶和血漿瓶代替。
培養瓶
專為培養細胞設計,要求選用優質材料制作,瓶壁厚度均勻,便于細胞貼壁生長和觀察;瓶口大小需一致,口徑一般不小于 1 厘米,以保證吸管能伸入瓶內任何部位。其規格有 200 毫升、100 毫升、30 毫升、25 毫升、15 毫升等。
培養皿
常用于培養和分離組織以及軟瓊脂培養等,規格按直徑劃分,有 60 毫米、120 毫米等。
吸管
包括刻度吸管和短尖頭吸管。刻度吸管主要用于移送培養液,常用規格有 20 毫升、10 毫升、5 毫升和 1 毫升等。短吸管分為彎頭和直頭兩種,直頭吸管可用于吸加少量培養液、吸細胞懸液、加抗菌素、加 NaHCO?調 pH 等;彎頭吸管除了移液,還能吸取組織塊,在組織塊培養法中用于擺布組織塊等。這些吸管在清洗晾干后、消毒之前,需在管的根端口中用尖鑷取少許脫脂棉堵塞,堵塞的松緊度要適宜,過多會妨礙透氣,過少則易脫落且起不到防異物的作用。
離心管
離心、漂洗和分離細胞是培養細胞的常規操作,常用的離心管規格有 50 毫升、15 毫升、10 毫升、 5 毫升、1 毫升等。
此外,還有各種規格的三角燒瓶、燒杯、量筒、漏斗、試管、注射器、貯存細胞用的安瓿等常規玻璃器皿,它們在組織培養的不同環節中發揮著各自的作用。
塑料瓶皿
近年來,我國開始使用塑料瓶皿進行組織培養。這種特制塑料瓶皿具有透明平坦、無毒性且有利于細胞生長的優點。目前,國內部分實驗室已應用這類器皿,但多為進口產品。塑料瓶皿通常經過消毒并密封包裝,使用時打開包裝即可,一般為一次性使用。若反復使用,刷洗和消毒過程較為麻煩,還可能影響細胞的貼附性,且容易產生劃痕。不過,塑料培養瓶皿已成為國際通用的培養用品,隨著經濟的發展,我國的應用也必將越來越廣泛。
多孔培養板
由底板和蓋板兩部分組成,每塊底板上有多個圓孔,適用于單細胞克隆、生長曲線測定、藥物測試和單克隆抗體等研究。其規格有 4 孔、6 孔、24 孔、96 孔等多種。
培養皿
形狀與玻璃培養皿相同,規格按直徑分有 30 毫米、60 毫米、100 毫米等。
培養瓶
帶有螺旋帽,適用于在 CO?溫箱中培養,規格按底面積分有 25 平方厘米、75 平方厘米等。
通用塑料培養用瓶皿在容積、表面積、細胞產量等方面各有不同,不同廠家的產品也各有特點,具體信息可參考相關表格。
隨著組織培養技術的不斷發展,無論是玻璃瓶皿還是塑料瓶皿,都在為細胞培養工作提供著重要的支持,滿足著不同實驗場景的需求。
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