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EpiQuik循環二甲基組蛋白H3K9 ELISA試劑盒(比色法)原理與實驗流程說明

來源:武漢艾美捷科技有限公司   2025年07月15日 16:28  

基因的表觀遺傳激活或失活在許多重要的人類疾病中,尤其是在癌癥中,扮演著關鍵角色。

表觀遺傳基因失活的主要機制是由于 DNA 甲基轉移酶引起的基因組 DNA 中 CpG 島的甲基化。組蛋白甲基轉移酶(HMTs)通過染色質依賴的轉錄抑制或激活來控制或調節 DNA 甲基化。HMTs 將 1-3 個甲基基團從 S-腺苷 - L - 甲硫氨酸轉移到組蛋白的賴氨酸和精氨酸殘基上。G9a 是主要的組蛋白甲基轉移酶,它催化哺乳動物細胞中組蛋白 H3 在賴氨酸 9H3K9)處的二甲基化。JHDMs 和 JMJDs 是主要的組蛋白去甲基化酶,負責去甲基化 H3K9。二甲基 H3K9H3K9me2)一直被視為轉錄抑制基因的標志性標記,它僅位于啟動子下游的 5' 區域。H3K9me2 也可以通過抑制或激活 HMTs 來改變。在血漿或血清中觀察到并被證實為許多不同疾病或病理變化(如癌癥進展)的標記物的循環組蛋白 H3K9me2。因此,檢測循環 H3K9me2 將為更好地理解基因激活和沉默的表觀遺傳調控、與組蛋白修飾相關的病理過程、疾病相關生物標志物的篩選以及開發針對組蛋白修飾的藥物提供有用的信息。

 

EpiQuik™ 循環二甲基組蛋白 H3K9 ELISA 試劑盒(比色法)是一套便捷的工具包,允許實驗者從人類、小鼠或大鼠的生物液體樣本(如血漿和血清)中特異性地測量循環二甲基組蛋白 H3K9H3K9me2)。  

 

艾美捷EpiQuik循環二甲基組蛋白H3K9 ELISA試劑盒(比色法)#P-3116-48)優勢與特點:

快速高效的實驗流程,可在 2.5 小時內完成。

高靈敏度和特異性。檢測限低至 0.5 ng/孔,血漿/血清在指定量范圍內(1-20 ng/孔)的動態范圍。僅識別 H3K9me2,與未修飾的 H3 或同一賴氨酸位點的其他修飾無交叉反應。

方便地包含對照,用于 H3K9me2 的定量。

條帶微孔板格式使實驗具有靈活性:可手動或高通量操作。

簡單、可靠且一致的實驗條件。  

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圖:使用 EpiQuik™ 總組蛋白提取試劑盒(Cat. #OP0006)從 HL-60 細胞中提取組蛋白,并將其以不同濃度摻入牛血漿中。使用 EpiQuik™ 循環二甲基組蛋白 H3K9 ELISA 試劑盒(比色法)測定 H3K9me2 的含量。

 

原理與實驗流程:

該試劑盒用于測量血漿或血清中的總 H3K9me2。使用該試劑盒進行實驗時,血漿/血清樣本中 K9 位點二甲基化的組蛋白 H3 蛋白被固定在涂有抗 H3K9me2 抗體的條帶孔中。捕獲的 H3K9me2 蛋白隨后可被檢測抗體識別,再通過顯色試劑進行顯色。H3K9me2 的比例與吸光度強度成正比。通過與標準對照比較,可以定量測定 H3K9me2 的絕對量。

 

起始材料:

起始材料應為血漿或血清。每次實驗的血漿或血清用量為 10 至 40 uL,最佳用量為 30 uL


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