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白色綠僵菌的特點與培養及使用范圍與保存方法!

來源:北京百歐博偉生物技術有限公司   2025年07月10日 17:46  

白色綠僵菌Metarhizium ablum Petch)分生孢子擬卵形或橢圓形,菌落產孢前形成菌絲段(菌體)而不是由菌絲體組成的膨大團塊,孢子灰棕色。該菌是葉蟬的專性寄生菌。

 

一、菌種簡介

平臺編號:Bio-17433

提供形式:凍干粉

英文名稱:Metarhizium album

中文名稱:白色綠僵菌

屬名:Metarhizium

種名加詞:album

來源歷史:←從美國NRRL引進

原始編號:20421

模式菌株:非模式菌株

主要用途:a:5:{i:0;s:4:分類;i:1;s:4:研究;i:2;s:4:教學;i:3;s:8:分析檢測;i:4;s:4:生產;}

特征特性:在PDA瓊脂培養基上生長,菌落白色,產生突起。分生孢子梗瓶形,分生孢子長橢圓形至短柱形。

具體用途:生物防治用菌

生物危害程度:四類

致病對象:動物

培養基編號1:14

資源保藏類型:a:1:{i:0;s:6:培養物;}

保存方法:a:3:{i:0;s:14:真空冷凍干燥法;i:1;s:8:礦物油法;i:2;s:10:定期移植法;}

共享方式:a:4:{i:0;s:10:公益性共享;i:1;s:16:資源純交易性共享;i:2;s:12:合作研究共享;i:3;s:14:資源交換性共享;}

提供形式:斜面培養物

用途:生物防治用菌

注意事項:僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產品信息以出庫為準)

 

二、菌株特點

1、菌種功能明確、品種穩定;

2、本品芽孢含量高,穩定性好、耐高溫和擠壓;

3、繁殖能力快、定植能力強、易存活、耐受低pH值環境;

4、復活迅速,可在短期內成為優勢種群;

5、本品安全高效、無抗藥性、不污染環境;

6、對多數抗生素不敏感,可與低濃度抗革蘭氏陰性菌抗生素同時使用。

 

三、菌株培養

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業發酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續挑取少許,接入瓊脂斜面培養基上,在25℃(或較高溫度)下培養5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數采用大米、小米之類的天然培養基)。

5、將培養成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養基上,于25~28℃培養14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續使用半年左右。

6、如果有些生產菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。

 

四、使用范圍

1)合成培養基。合成培養基的各種成分是已知的各種化學物質。這種培養基的化學成分清楚,組成成分精確,重復性強,而且微生物在這類培養基中生長較慢。如高氏一號合成培養基、察氏(Czapek)培養基等。

2)天然培養基。由天然物質制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養霉菌,后者用于培養細菌。這類培養基的化學成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營養豐富,培養效果好,所以常被采用。

3)半合成培養基。在天然有機物的基礎上適當加入已知成分的無機鹽類,或在合成培養基的基礎上添加某些天然成分,如培養霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基。這類培養基能更有效地滿足微生物對營養物質的需要。

 

五、保存方法

1、傳代保存法:培養基的濃度不宜過高,營養成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養溫度通常以稍低于生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養基中添加少量碳酸鈣。

2、液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

3、懸液保存法:

①蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發。

②糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

4、載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。

5、常用的冷凍保存法:

①低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。

②干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。

③液氮保存法(-196℃):是適用范圍的微生物保存法。

 

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