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細(xì)胞通訊的摩斯密碼:EGF & TGF生長因子使用指南,解鎖實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵開關(guān)!

來源:上海瑋馳儀器有限公司   2025年07月10日 17:37  

在微觀的細(xì)胞王國里,沒有電話,沒有微信,細(xì)胞們?nèi)绾尉珳?zhǔn)調(diào)控自己的命運(yùn)——何時(shí)分裂增殖?何時(shí)分化成熟?何時(shí)遷移修復(fù)?何時(shí)功成身退?答案就藏在那些被稱為“生長因子”的蛋白質(zhì)小分子中!它們?nèi)缤?xì)胞間的摩斯密碼,傳遞著至關(guān)重要的生命指令。今天,我們聚焦兩位“明星信使”:EGF(表皮生長因子)和TGF(轉(zhuǎn)化生長因子),揭秘它們的功能奧秘與實(shí)驗(yàn)應(yīng)用技巧!

 

一、明星登場:認(rèn)識EGFTGF家族

1. EGF (Epidermal Growth Factor) 表皮生長因子

身份: 最早被發(fā)現(xiàn)、研究zui廣泛的生長因子之一,屬于EGF家族(包含HB-EGF, TGF-α等)。

核心使命: 強(qiáng)力促進(jìn)細(xì)胞增殖!

 靶細(xì)胞: 廣泛作用于上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞、多種干細(xì)胞等。

 關(guān)鍵作用:

刺激細(xì)胞分裂與增殖: 加速傷口愈合、組織修復(fù)。

促進(jìn)細(xì)胞遷移: 在胚胎發(fā)育、傷口愈合中起關(guān)鍵作用。

抑制細(xì)胞凋亡: 維持細(xì)胞存活。

參與發(fā)育分化: 影響特定組織器官的形成。

信號通路: 結(jié)合細(xì)胞膜上的EGFR(表皮生長因子受體) → 觸發(fā)受體二聚化及自磷酸化 → 激活下游RAS-RAF-MEK-ERK (MAPK通路和 PI3K-AKT-mTOR通路 → 促進(jìn)細(xì)胞周期進(jìn)程(G1S期)及生存。

 

2. TGF (Transforming Growth Factor) 轉(zhuǎn)化生長因子

身份: 一個(gè)龐大的超家族,成員眾多,功能復(fù)雜多樣,甚至相反!最核心、研究最深入的是 TGF-β亞家族 (包括TGF-β1, β2, β3, Activins, Nodal, BMPs)

核心使命: 高度環(huán)境依賴,功能“雙面刃”!

 靶細(xì)胞: 幾乎影響所有細(xì)胞類型。

 關(guān)鍵作用 (TGF-β1為代表)

抑制增殖: 對大多數(shù)上皮細(xì)胞和免疫細(xì)胞是強(qiáng)效的生長抑制劑(使細(xì)胞停滯在G1期)。

促進(jìn)分化: 誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞分化;參與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT),這在胚胎發(fā)育、傷口愈合(早期)、但也與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)。

刺激細(xì)胞外基質(zhì)合成: 促進(jìn)膠原等ECM蛋白產(chǎn)生,對組織纖維化至關(guān)重要(過度則導(dǎo)致病理性纖維化)。

免疫調(diào)節(jié): 主要發(fā)揮免疫抑制作用,調(diào)節(jié)T細(xì)胞分化,維持免疫耐受。

促進(jìn)凋亡: 在某些情況下誘導(dǎo)特定細(xì)胞死亡。

信號通路: 結(jié)合細(xì)胞膜上的II型受體 → 招募并磷酸化I型受體 → 激活受體調(diào)節(jié)的Smad蛋白 (R-SmadsSmad2/3 for TGF-β/Activin/Nodal, Smad1/5/8 for BMPs) → R-SmadsCo-Smad (Smad4) 形成復(fù)合物入核 → 調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄。非Smad通路(如MAPK, PI3K)也參與其復(fù)雜調(diào)控。

 

二、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用:如何正確使用這些“魔法因子”?

關(guān)鍵操作要點(diǎn):步步為營

1. 儲(chǔ)存與復(fù)溶:

 嚴(yán)格按說明書操作! 通常是凍干粉或高濃度溶液保存在-20°C-80°C

 復(fù)溶時(shí)使用無菌、無內(nèi)毒素的溶劑(通常是含載體蛋白如BSA的緩沖液或培養(yǎng)用基礎(chǔ)液)。避免反復(fù)凍融!

 復(fù)溶后根據(jù)使用頻率分裝,儲(chǔ)存于-20°C-80°C。工作液可在4°C短期存放(1-2周,依說明書)。

 

2. 工作濃度:黃金法則!

 濃度范圍差異巨大! 切忌經(jīng)驗(yàn)主義!

 必查文獻(xiàn)! 參考你所研究特定細(xì)胞類型的相關(guān)文獻(xiàn)中使用的濃度。

 必看說明書! 商品化因子會(huì)提供建議濃度范圍。

 典型參考范圍 (需驗(yàn)證!)

EGF: 常用 1 - 100 ng/mL (如原代角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)常加10-20 ng/mL)

TGF-β1: 常用 0.1 - 20 ng/mL。濃度過低可能無效,過高可能誘導(dǎo)非預(yù)期效應(yīng)(如強(qiáng)EMT或過度纖維化)。1-5 ng/mL 常用于抑制增殖或誘導(dǎo)輕度EMT

 進(jìn)行濃度梯度預(yù)實(shí)驗(yàn): 對于新細(xì)胞或關(guān)鍵實(shí)驗(yàn),務(wù)必設(shè)置不同濃度梯度(如0, 0.1, 1, 5, 10, 20 ng/mL),找到蕞優(yōu)效果且無細(xì)胞毒性的濃度。

 

3. 添加方式:

 直接加入培養(yǎng)基: 最常見方式。在無菌操作下,將計(jì)算好體積的生長因子溶液輕柔加入wan全培養(yǎng)基中,充分混勻。

 更換含因子培養(yǎng)基: 在需要精確控制作用時(shí)間或去除舊因子影響時(shí)(如誘導(dǎo)分化),吸掉舊培養(yǎng)基,加入新配制的含因子培養(yǎng)基。

 

4. 作用時(shí)間:

 EGF: 促進(jìn)增殖通常需要持續(xù)暴露(每次換液都需添加)。

 TGF-β其效應(yīng)可能是時(shí)間依賴性的:

短期處理(幾小時(shí)到幾天):可能快速激活信號(如磷酸化Smad2/3),誘導(dǎo)部分基因表達(dá)。

長期處理(數(shù)天到數(shù)周):才能觀察到明顯的表型變化(如生長抑制、EMT、基質(zhì)沉積、分化標(biāo)志物表達(dá))。需根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑O(shè)計(jì)處理時(shí)長。

 

逐典生物推出多種細(xì)胞培養(yǎng)關(guān)鍵生長因子因子,具備高生物活性,高純度和高結(jié)構(gòu)均一性,質(zhì)控嚴(yán)格,確保強(qiáng)特異性、高靈敏度、高穩(wěn)定性及良好的重復(fù)性,全面助力MSC相關(guān)藥物研發(fā)及上市。

 

1. bFGF(CY024F0010)

重組人 bFGF 利用小鼠 Balb/c 3T3 細(xì)胞刺激細(xì)胞增殖, ED50≤0.05 ng/mL,對應(yīng)的比活性≥1.0 × 107 units/mg

圖片1.png 

2. EGF(CY069F0010)

重組人 EGF 通過小鼠 Balb/c 3T3 細(xì)胞刺激細(xì)胞增殖,ED50≤0.1 ng/mL,對應(yīng)的比活性≥1.0×10Units/mg

圖片2.png 

 

訂購信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品規(guī)格(μg)

產(chǎn)品貨號

EGF

10 μg

CY069F0010

20 μg

CY069F0020

50 μg

CY069F0050

50 μg

CYG069F0050

500 μg

CYG069F0500

bFGF

10 μg

CY024F0010

20 μg

CY024F0020

50 μg

CY024F0050

50 μg

CYG024F0050

500 μg

CYG024F0500

PDGF-AA

10 μg

CY056F0010

20 μg

CY056F0020

50 μg

CY056F0050

PDGF-BB

10 μg

CY035F0010

20 μg

CY035F0020

50 μg

CY035F0050

 


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