Thermo Scientific RIPA 裂解和提取緩沖液是一種用于培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞的常用細(xì)胞裂解試劑的高質(zhì)量、即用型且披露的配方。

RIPA 裂解緩沖液的特點(diǎn)：

•便利— 即用型解決方案；無需自行裝配和制備組成部分

•靈活— 可與許多應(yīng)用兼容，包括報(bào)告基因檢測、蛋白檢測、免疫檢測和蛋白純化

•通用— 可提取細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜和細(xì)胞核蛋白

•披露的配方— 不含專有組成部分，用戶可全面控制和了解可能存在的兼容性問題

該 RIPA 緩沖液可從培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞（包括鋪板細(xì)胞和團(tuán)狀懸浮細(xì)胞）中高效裂解并提取蛋白。該常用試劑可提取細(xì)胞膜、細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)蛋白，并可與許多應(yīng)用兼容，包括報(bào)告基因檢測、Thermo Scientific BCA 蛋白檢測、免疫檢測和蛋白純化。Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制劑混合物（產(chǎn)品編號(hào) 78430）和 Halt 磷酸酶抑制劑混合物（產(chǎn)品編號(hào) 78420）等抑制劑也可與該 RIPA 緩沖液配方兼容，可在使用前添加以防止蛋白水解并保持蛋白磷酸化。

RIPA 緩沖液的名稱來源于為其開發(fā)這種緩沖液的原始應(yīng)用：放射免疫沉淀測定。盡管目前在實(shí)驗(yàn)室中很少使用這種同位素檢測方法，但該裂解緩沖液配方的首字母縮略詞已被廣泛使用。RIPA 細(xì)胞裂解試劑可從各種細(xì)胞類型中高效提取蛋白，因?yàn)槠浜腥N非離子型和離子型去污劑。該去污劑配方的一大劣勢是，與其他裂解試劑相比，其與某些下游應(yīng)用相對不兼容。

RIPA 裂解和提取緩沖液規(guī)格

相關(guān)產(chǎn)品

1、Pierce™ IP 裂解緩沖液

Thermo Scientific Pierce IP 裂解緩沖液針對細(xì)胞裂解物的產(chǎn)量、純度以及與免疫沉淀（IP 和 Co-IP）（作為與細(xì)胞裂解物相關(guān)的下游應(yīng)用）的兼容性進(jìn)行了優(yōu)化。

IP 裂解緩沖液的特點(diǎn)：

•經(jīng)過優(yōu)化，可與各種免疫沉淀和牽出測定兼容

• 與各種蛋白測定、報(bào)告基因測定和免疫檢測程序兼容

• 現(xiàn)成的配方，可有效提取細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜和細(xì)胞核蛋白

• 溫和的配方可幫助保持蛋白復(fù)合物用于免疫共沉淀

• 不會(huì)釋放可導(dǎo)致樣品高粘性的基因組 DNA

IP 裂解緩沖液是一種基于改良 RIPA 緩沖液配方（不含 SDS）的哺乳動(dòng)物全細(xì)胞裂解試劑。這種中等強(qiáng)度裂解緩沖液可高效溶解細(xì)胞蛋白，但不會(huì)像一般 RIPA 緩沖液那樣釋放染色體組 DNA 或破壞蛋白復(fù)合物。Pierce IP 裂解緩沖液經(jīng)過特殊配方，可用于各種牽出測定和免疫沉淀檢測。

Pierce IP 裂解緩沖液可從孔板細(xì)胞和經(jīng)懸浮培養(yǎng)液粒化的細(xì)胞中有效裂解出培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞。該裂解緩沖液經(jīng)過優(yōu)化可用于各種牽出測定和免疫沉淀檢測，還可與很多其他應(yīng)用兼容，包括 Thermo Scientific Pierce BCA 和 660 nm 蛋白測定、蛋白純化和各種免疫檢測（如 ELISA、Western 印跡）。

Pierce IP 裂解緩沖液由 25 mM Tris-HCl pH 7.4、150 mM NaCl、1 mM EDTA、1% NP-40 和 5% 甘油組成。該緩沖液不含蛋白酶或磷酸酶抑制劑；但是如果需要，可在使用前添加各種抑制劑，如 Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制劑混合物或磷酸酶抑制劑混合物，以防止蛋白水解并保持蛋白磷酸化。

2、M-PER™ 哺乳動(dòng)物蛋白提取試劑

Thermo Scientific M-PER哺乳動(dòng)物蛋白質(zhì)抽提試劑用于從培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中高效抽提總可溶性蛋白。

M-PER哺乳動(dòng)物蛋白抽提試劑的特點(diǎn)：

• 作用溫和— 溫和的除垢劑裂解，產(chǎn)生的抽提物直接與考馬斯(Bradford)和BCA蛋白定量分析試劑或SDS-PAGE兼容

• 兼容性強(qiáng)— 抽提的可溶性蛋白處于非變性狀態(tài)，可直接用于免疫沉淀反應(yīng)和其他親和純化過程

• 不含胺基并且可透析— 確保其與隨后的分析系統(tǒng)兼容

• 方便— 貼壁細(xì)胞直接在板上裂解或者在剝離和洗滌后懸浮于溶液中

• 非變性— 維持熒光素酶、β-半乳糖苷酶、CAT和其他報(bào)告基因的活性，與其他供應(yīng)商的產(chǎn)品和冷凍/解凍方法一樣好或更出色

這款完整的細(xì)胞裂解試劑是一種非變性除垢劑配方，可在短短5分鐘內(nèi)溶解細(xì)胞膜并抽提總可溶性細(xì)胞蛋白。M-PER試劑很少或根本不需要機(jī)械破碎，并且相比冷凍/解凍循環(huán)方法和超聲波破碎方法可以獲得更多的蛋白。這種哺乳動(dòng)物細(xì)胞裂解試劑是如此有效，不需要從培養(yǎng)皿上剝離貼壁細(xì)胞，可以簡單而直接地在生長細(xì)胞的24孔和96孔板上進(jìn)行裂解和分析。最終無論是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞的裂解產(chǎn)物與很多下游分析都兼容，包括免疫分析、酶分析和各種常見的報(bào)告基因分析。

在任何蛋白質(zhì)組學(xué)分析過程中，蛋白質(zhì)抽提通常都是關(guān)鍵的第一步，首先細(xì)胞必須裂解，以便打開細(xì)胞并釋放出感興趣的蛋白質(zhì)。常用的幾種物理裂解細(xì)胞方法包括機(jī)械破壞、液體均質(zhì)化、超聲波裂解、冷凍/解凍循環(huán)和手工研磨。

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