ATTO 590 NHS Ester 是一種基于羅丹明(Rhodamine)結構的新型熒光標記物,具有強吸收、高熒光量子產率、高熱穩定性和光化學穩定性。它適用于單分子檢測和高分辨率顯微鏡技術,如PALM、dSTORM和STED。
基礎知識概述:
英文名: ATTO 590 Succinimidyl Ester,ATTO 590 NHS ester
分子式:C41H42ClN3O11
分子量:788.24
規格標準:1mg、5mg、10mg
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
相關應用:
ATTO 590 NHS Ester 可用于標記蛋白質、抗體和胺修飾的寡核苷酸。它還可用于流式細胞術(FACS)、熒光原位雜交(FISH)、FRET等生物檢測。此外,它也可以作為Alexa Fluor 594的替代品。
使用方法:
1.標記蛋白質:
準備蛋白質溶液:將目標蛋白質溶解在PBS緩沖液(pH 7.2-7.4)中,確保蛋白質濃度在2-10 mg/mL之間。
調整pH值:如果蛋白質溶液的pH值低于8.0,使用1 M碳酸氫鈉溶液或pH 9.0的磷酸鹽緩沖液調整pH至8.0-9.0。
制備染料溶液:將ATTO 590 NHS Ester溶解在無水DMSO中,制備10 mM的染料溶液。
反應:將染料溶液與蛋白質溶液按10:1的摩爾比混合,室溫下反應30-60分鐘。
純化:使用Sephadex G-25凝膠過濾柱去除未結合的染料。
2.標記寡核苷酸:
ATTO 590 NHS Ester可用于標記胺修飾的寡核苷酸,適用于熒光成像和FRET應用
注意事項:
溶劑選擇:染料溶液應在無水DMSO或乙腈中制備,避免使用含有胺的溶劑。
反應條件:反應pH值應控制在8.0-9.0之間,以確保最佳反應效率。
儲存條件:染料溶液應避光保存于-20°C,避免反復凍融。
純化步驟:標記后的蛋白質或寡核苷酸需要通過凝膠過濾或色譜法去除未結合的染料。
結構式:
質量控制:95%+
存儲條件:-20°C,避光,避濕
用途:僅供科研實驗使用,不用于診治
注意事項:取用一定要干燥,避免頻繁的溶解和凍干
取用:現配現用,將包裝從冰箱中取出,置于干燥器中緩慢升至室溫,打開瓶蓋,取用。取用后充入惰性氣體,封口膜封口,擰緊瓶蓋裝入自封袋,及時放入冰箱。
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