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實驗室液相色譜儀的計量校準

來源:廣東森德儀器有限公司   2025年07月09日 14:46  
  實驗室液相色譜儀的計量校準是一個涉及多個方面的過程,以下是詳細的步驟和注意事項:
  一、環境條件
  在進行液相色譜儀的計量校準前,應確保環境條件符合以下要求:
  室溫應保持在(15~30)℃,校準過程中溫度變化不超過3℃(對于差示折射率檢測器,室溫變化不超過2℃)。
  室內相對濕度應保持在(20~85)%。
  房間內不得存放易燃、易爆、強腐蝕性物品。
  無明顯的機械振動和電磁干擾,且通風良好。
  二、標準物質和校準設備
  應使用國家有證標準物質,并確保校準設備經過計量檢定合格。常用的標準物質包括:
  萘-甲醇溶液標準物質,定值為1.00×10^-4g/mL,擴展不確定度小于4%。
  膽固醇甲醇溶液標準物質,標準值為200μg/mL,擴展不確定度小于2.0%。
  其他根據具體校準需求選擇的標準物質。
  校準設備可能包括移液器、容量瓶、溫度計等。
 

 

  三、校準步驟
  1.輸液系統校準
  泵的耐壓性:連接好儀器各部分,以甲醇(或純水)為流動相,流速設為0.2mL/min。啟動儀器并保持壓力穩定10分鐘,檢查各管道接口處是否有泄漏。取下色譜柱,堵塞泵出口端,使壓力達到最大允許值的90%,保持5分鐘,確認無泄漏。
  泵流量設定誤差及流量穩定性:按要求設定流速,啟動儀器并待壓力穩定后,用清潔容量瓶在流動相出口處收集流動相,計時并稱重,計算所測流速。重復校準3次以確保準確性。
  梯度誤差:設置梯度洗脫程序,用溶劑A(如水)和溶劑B(如含0.1%丙酮的水溶液)進行梯度變化曲線的繪制和計算。
  2.柱箱溫度設定點誤差和穩定性校正
  將數字溫度計探頭置于色譜柱恒溫器中與色譜柱相同的位置。
  選擇設定溫度(如35℃和45℃),待溫度穩定后記錄讀數,并每10分鐘記錄一次,共7次。
  計算平均值與設定值間的差值作為柱溫設定值的誤差,7個讀數中的極大值與最小值之差作為柱溫穩定性。
  3.探測器標定
  以紫外可見光探測器和二極管陣列探測器為例,連接好儀器各部分,選用合適的色譜柱和流動相。
  設置相應的測量參數,如波長、靈敏度等。
  基線穩定后注入一定體積的標準物質溶液(如1.0×10^-4g/mL的萘-甲醇溶液),連續測定并記錄色譜峰的保留時間和峰面積。
  4.進樣體積準確性校準(如適用)
  可采用標準品校準法、稱重法、定量環校準法或與標準進樣器對比法等方法進行。
  標準品校準法:使用已知濃度的標準品溶液多次進樣,記錄色譜峰響應值并計算進樣體積的準確性。
  稱重法:通過稱重計算實際吸取的溶劑體積并與設定體積進行對比。
  定量環校準法:檢查定量環的體積準確性,通過觀察色譜峰形狀和響應值來判斷。
  與標準進樣器對比法:使用標準進樣器進行對比分析,計算進樣體積的偏差并進行調整。
  四、校準記錄和報告
  在校準過程中應詳細記錄各項數據和觀察結果。
  校準完成后應編寫校準報告,包括校準日期、環境條件、校準設備、校準步驟、數據記錄和分析結果等內容。
  校準報告應由專業人員審核并簽字確認。
  五、注意事項
  校準過程中應嚴格遵守操作規程和安全規范。
  使用標準物質時應確保其有效期內并妥善保存。
  校準設備應定期維護和檢定以確保其準確性。
  實驗室液相色譜儀的計量校準是一個復雜而精細的過程,需要專業人員嚴格按照操作規程進行以確保儀器的準確性和可靠性。

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