多功能酶標儀作為定量檢測的核心設備,其校準與維護直接關系到實驗數據的準確性。以下從校準流程、日常維護和操作規范三方面提供系統性解決方案:
一、定期校準:確保檢測精度
光路校準
波長準確性:使用標準汞燈(如253.7nm、365.0nm)或氘燈(如486.0nm、656.1nm)驗證儀器波長,偏差需≤±1nm。例如,檢測熒光標記物時,若波長偏移5nm,信號強度可能下降30%以上。
光強度均勻性:用中性密度濾光片(如OD=1.0)覆蓋酶標板孔,檢測各孔吸光度值差異,均勻性應≥95%。若不均勻,需清潔光路透鏡或調整光源位置。
溫度控制校準
檢測模塊溫度(如37℃孵育功能)需用高精度溫度計(分辨率0.1℃)驗證,偏差應≤±0.5℃。溫度波動會影響酶促反應速率,導致檢測結果重復性差。
線性范圍驗證
配置系列濃度標準品(如0、10、50、100、200ng/mL),檢測吸光度值并繪制標準曲線,R²需≥0.995。若線性不佳,需檢查檢測器增益設置或更換光源。
二、日常維護:延長設備壽命
光路清潔
每周用無塵布蘸取異丙醇輕擦濾光片、透鏡和光纖接口,避免灰塵或指紋污染。例如,熒光檢測中,濾光片污漬可能導致信號背景值升高50%以上。
傳動系統保養
每月對酶標板載架軌道涂抹專用潤滑脂(如硅基潤滑脂),減少機械磨損。若載架運行卡頓,需檢查同步帶張力或更換磨損齒輪。
耗材管理
使用匹配酶標儀的專用酶標板(如96孔平底板),避免孔深或材質差異導致光程誤差。例如,化學發光檢測需用白色不透明酶標板,若誤用透明板,信號強度可能降低80%。
三、操作規范:減少人為誤差
預熱與穩定
開機后預熱30分鐘,使光源和檢測器達到熱平衡狀態。未預熱直接檢測可能導致吸光度值波動±0.05Abs。
樣本處理
避免氣泡產生:加樣時槍頭緊貼孔壁,緩慢釋放液體,防止氣泡干擾光路。例如,氣泡可能導致吸光度值虛高0.1-0.3Abs。
數據復核
每批次檢測需包含質控品(如已知濃度標準品),若質控值超出±2SD范圍,需重新校準儀器或復查實驗流程。
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