高特異性:通過生物素與親和素(avidin/streptavidin)的強特異性結合,實現對目標分子的精確標記。
高靈敏度:Cyanine3(CY3)是一種高亮度的熒光染料,能夠產生強烈的熒光信號,提高檢測靈敏度。
穩定性好:在多種實驗條件下均能保持穩定的熒光性能和結合能力。
低光漂白性:CY3熒光團具有較低的光漂白性,能夠在長時間成像過程中保持穩定的熒光強度。
基礎知識概述:
英文名:Cy3-Biotin,Cyanine3-Biotin
分子式:C46H65ClN6O3S
分子量:817.56
規格標準:1mg、5mg、10mg
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
相關應用:
1.細胞成像與定位:
蛋白質追蹤:標記生物素化抗體,通過鏈霉親和素-Cy3復合物定位細胞膜受體。
核酸檢測:用于熒光原位雜交(FISH),標記生物素化DNA/RNA探針。
2.流式細胞術:
在多色分析中與Cy5/FITC等染料兼容,同時檢測細胞表面多種抗原。
3.免疫組化:
結合特異性抗體,實現對組織切片中特定抗原的熒光標記和定位。
4.分子互作研究:
在Pull-down實驗中,CY3-Biotin標記誘餌蛋白,結合鏈霉親和素磁珠捕獲相互作用蛋白。
5.活體與超分辨成像:
CY3耐光漂白特性適用于STORM/PALM等超分辨成像技術。
使用方法:
1.樣品準備:
細胞/組織:固定或活細胞懸液(如流式細胞術需制備單細胞懸液)。
生物分子:DNA、RNA或蛋白質需預先純化并調整濃度。
抗體預處理:若用于免疫組化,需先使用生物素化一抗孵育樣本。
2.標記反應:
稀釋試劑:將Cyanine3-Biotin用緩沖液(如PBS)稀釋至工作濃度(通常1–10 μg/mL)。
孵育條件:將稀釋后的Cyanine3-Biotin與樣品混合,在避光環境中孵育(溫度:25–37℃;時間:30分鐘–2小時)。
特異性結合:通過生物素-親和素系統靶向目標分子(如蛋白質、核酸或細胞表面受體)。
3.洗滌:
用緩沖液(如PBS)洗滌3次,每次5分鐘,去除未結合的Cyanine3-Biotin,降低背景信號。
4.檢測:
熒光顯微鏡:直接觀察樣本,使用550 nm激發光,收集570 nm發射信號。
流式細胞術:分析細胞表面或內部標記物的表達分布。
包裝:
質量控制:95%+
存儲條件:-20°C,避光,避濕
用途:僅供科研實驗使用,不用于診治
注意事項:取用一定要干燥,避免頻繁的溶解和凍干
取用:現配現用,將包裝從冰箱中取出,置于干燥器中緩慢升至室溫,打開瓶蓋,取用。取用后充入惰性氣體,封口膜封口,擰緊瓶蓋裝入自封袋,及時放入冰箱。
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供應商:陜西新研博美生物科技有限公司
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