高熒光亮度:AF594 是一種水溶性的紅熒光染料,熒光亮度高,光穩定性好。
pH穩定性:在pH 4-10范圍內熒光不受影響。
高標記效率:通過NHS酯基團與生物分子中的伯胺(-NH2)反應,形成穩定的酰胺鍵。
高水溶性:磺化結構使其具有良好的水溶性,減少蛋白質聚集。
基礎知識概述:
英文名:AF594 Ethyl NHS Ester
規格標準:1mg、5mg、10mg
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
相關應用:
1.蛋白質標記:
可用于標記抗體、蛋白質、肽段等生物分子。
2.核酸標記:
可用于標記胺修飾的寡核苷酸。
3.多色成像:
適用于多色熒光顯微鏡、流式細胞術和超分辨成像技術(如dSTORM、SIM、STED等)。
使用方法:
1.標記蛋白質:
準備蛋白質儲備液(溶液A):
將100 μL反應緩沖液(如pH 8.5-9.0的1 M碳酸氫鈉溶液)與900 μL目標蛋白溶液(濃度>2 mg/mL)混合。
蛋白質溶液的pH值應為8.5±0.5。
準備染料儲備液(溶液B):
將無水DMSO加入AF594 NHS酯中,制備10 mM儲備溶液。
染料儲備溶液應在制備后立即使用,避免長期保存。
進行偶聯反應:
使用10:1的摩爾比(染料/蛋白質)作為起始點,將5 μL染料儲備液加入到95 μL蛋白質溶液中。
在室溫下孵育30-60分鐘。
純化偶聯物:
使用Sephadex G-25柱純化染料-蛋白質偶聯物。
2.標記寡核苷酸:
按照類似步驟進行標記,調整反應條件以適應寡核苷酸。
包裝:
質量控制:95%+
存儲條件:-20°C,避光,避濕
用途:僅供科研實驗使用,不用于診治
注意事項:取用一定要干燥,避免頻繁的溶解和凍干
取用:現配現用,將包裝從冰箱中取出,置于干燥器中緩慢升至室溫,打開瓶蓋,取用。取用后充入惰性氣體,封口膜封口,擰緊瓶蓋裝入自封袋,及時放入冰箱。
相關試劑:
DHPDS disodium salt
5-FAM maleimide
Methyl Orange
Cy7 tyramide
Sulfo-Cyanine7 NHS ester TEA
1,6-Diphenylhexa-1,3,5-triene
Sulfo-Cy5-Mal
Alexa fluor 488 azide ditriethylamine
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Cy5-DSPE chloride
Calcein Blue
Bromocresol green
BODIPY TR Ceramide
Vari Fluor 680-Streptavidin
Thiazole orange dimer YOYO 1
Sunset Yellow FCF
供應商:陜西新研博美生物科技有限公司
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