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梯度PCR儀操作流程

來源:孚約生物科技(上海)有限公司   2025年07月08日 15:32  

賽默飛梯度 PCR 儀的操作步驟如下:

一、準備工作

1、儀器準備:確保梯度 PCR 儀已正確連接電源并打開,檢查并確認儀器已校準(如有必要)。

2、樣本準備:準備好 PCR 反應混合物,包括模板 DNA/RNA、引物、dNTPs、緩沖液和 Taq DNA 聚合酶。根據實驗要求配置各反應組分的濃度和體積。


二、設置 PCR 反應

1、裝載樣品:使用 PCR 管或 PCR 板裝載反應混合物,確保每個反應孔中裝載的體積一致,并且避免氣泡。

2、放置樣品:將裝載好的 PCR 管或 PCR 板放入 PCR 儀的樣品槽中,確保放置穩固。


三、設置程序

1、選擇程序模式:啟動儀器,進入主菜單,選擇 “新建程序” 或從預設程序中選擇合適的程序。

2、設定溫度和時間:設置每個步驟的溫度和時間,包括變性、退火和延伸步驟。設置梯度范圍(如需要進行梯度 PCR),以確定最佳退火溫度,設定循環次數。

3、保存程序:將設定好的程序保存為特定名稱,以便下次使用。


四、運行 PCR

1、啟動程序:確認樣品和程序設置無誤后,按 “開始” 按鈕啟動 PCR 程序。

2、監控運行:在 PCR 運行過程中,通過顯示屏監控反應進度和溫度曲線,確保儀器運行正常,無異常報警。


五、結束和取出樣品

1、程序完成:程序完成后,儀器會自動停止并發出提示音。

取出 PCR 管或 PCR 板:小心避免污染。

2、樣品處理:進行后續分析,如瓊脂糖凝膠電泳或測序。


六、儀器清潔和維護

1、清潔儀器:定期用適當的清潔劑和無絨布擦拭儀器外部和樣品槽,確保樣品槽內無殘留液體或雜物。

2、維護保養:定期檢查和校準溫度傳感器,確保其準確性,定期更新儀器軟件(如適用),保持其最佳性能。


不同型號的賽默飛梯度 PCR 儀在操作上可能會有細微差異,具體操作請參考相應儀器的用戶手冊。

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