懸浮細(xì)胞是指在培養(yǎng)時(shí)不貼附于支持介質(zhì)上,而呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)的細(xì)胞。懸浮細(xì)胞通常來(lái)源于血液、淋巴組織,例如某些腫瘤細(xì)胞和轉(zhuǎn)化細(xì)胞。懸浮細(xì)胞的特點(diǎn)是細(xì)胞呈圓形,一般不貼附于支持物上,易于大量繁殖。在體外培養(yǎng)的細(xì)胞類型中,懸浮細(xì)胞可以呈單個(gè)細(xì)胞或細(xì)小的細(xì)胞團(tuán)生長(zhǎng)。
常見(jiàn)的懸浮細(xì)胞,如淋巴細(xì)胞和大部分血液系統(tǒng)來(lái)源細(xì)胞。(如小鼠白血病細(xì)胞WEHI-3, 人白血病細(xì)胞K-562, HL-60)。工業(yè)上也有貼壁傳代細(xì)胞被馴化,進(jìn)行全懸浮的培養(yǎng)。目前在工業(yè)中應(yīng)用的主要有骨髓瘤SP2/0、NS0、CHO、BHK和HEK293細(xì)胞等,它們主要用于重組蛋白質(zhì)生產(chǎn);在獸用生物制品中常用的傳代細(xì)胞主要有采用全懸浮培養(yǎng)的BHK21細(xì)胞、MDCK細(xì)胞;及借助微載體懸浮培養(yǎng)的Vero細(xì)胞、PK細(xì)胞、ST細(xì)胞、 Marc145細(xì)胞等。
工業(yè)與生物制藥常用懸浮細(xì)胞?
?HEK293F細(xì)胞?:高效表達(dá)外源蛋白,常用于基因工程和蛋白質(zhì)生產(chǎn)。????
?CHO細(xì)胞?:生物制藥領(lǐng)域的代表,適應(yīng)無(wú)血清懸浮培養(yǎng),適合大規(guī)模重組蛋白生產(chǎn)。????
?SF9細(xì)胞?:昆蟲(chóng)細(xì)胞系,用于桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)。??
?Yeast細(xì)胞(如Pichia pastoris)?:可實(shí)現(xiàn)糖基化等后翻譯修飾,用于基因工程。??
?Hybridoma細(xì)胞?:用于單克隆抗體生產(chǎn)。??
獸用生物制品與實(shí)驗(yàn)室研究細(xì)胞?
?BHK21與MDCK細(xì)胞?:獸用疫苗生產(chǎn)的常用懸浮細(xì)胞。??
?SP2/0與NS0細(xì)胞?:小鼠骨髓瘤細(xì)胞,用于抗體生產(chǎn)。??
?U937、HL60、K562?:人造血系腫瘤細(xì)胞,用于白血病等研究。??
?WEHI-3細(xì)胞?:小鼠白血病模型細(xì)胞。??
常見(jiàn)懸浮細(xì)胞類型?
?淋巴細(xì)胞?:天然懸浮生長(zhǎng),不依賴支持物表面。??
?小鼠腹水瘤S180?:實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤模型細(xì)胞。??
懸浮細(xì)胞有哪些?又如何固定不掉片做免疫熒光呢?
懸浮細(xì)胞種類繁多,如何固定不掉片?固定后可以做免疫熒光,固定后可以單細(xì)胞層刺激,固定后保持活性繼續(xù)短時(shí)培養(yǎng)。這些實(shí)驗(yàn)?zāi)康模梢允褂脩腋〖?xì)胞免疫熒光專用玻片Shi-Fix實(shí)現(xiàn)。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)刺激好,吸取一點(diǎn),PBS清洗,滴到玻片上,固定30分鐘,不要超過(guò)1小時(shí)。就可以實(shí)現(xiàn)懸浮細(xì)胞固定不掉片。
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