在生命科學研究領域,精準的實驗工具對于揭示生物奧秘、攻克疾病難題至關重要。Stressmarq SMC-401 作為一款針對鈉耦合中性氨基酸轉運蛋白 1(SNAT1)的單克隆 IgG1 抗體,憑借其高特異性和多場景適用性,在神經系統疾病、代謝性疾病以及腫瘤研究等方向發揮著關鍵作用,為科研工作者提供了深入探索的有力。
一、神經系統疾病研究中的應用
(一)阿爾茨海默?。ˋD)研究
阿爾茨海默病是一種嚴重威脅老年人健康的神經退行性疾病,其發病機制復雜,至今尚未明確。SNAT1 蛋白在中樞神經系統內特定神經元群體中表達,科研人員推測其與 AD 的病理進程存在關聯,故而借助 Stressmarq SMC-401 抗體展開深入研究。
研究人員收集了 AD 患者和正常對照的大腦組織,通過免疫組織化學(IHC)技術進行分析。在實驗操作上,嚴格遵循規范流程:對組織切片采用 4% 多聚甲醛固定后,使用檸檬酸鈉緩沖液(pH6.0)在 95℃條件下進行 20 分鐘的抗原修復,以還原被固定掩蓋的抗原表位;隨后用含有 5% 驢血清和 0.3% Triton X - 100 的封閉液在室溫下封閉 1 小時,減少非特異性背景染色;將 SMC-401 抗體按 1:1000 的比例稀釋,在 4℃環境下孵育過夜,使抗體與抗原充分結合;最后采用 HRP 標記的二抗結合目標抗體,并使用二氨基聯苯胺(DAB)進行顯色 。
實驗結果顯示,與正常對照相比,AD 患者大腦海馬區的 SNAT1 蛋白表達水平顯著降低,且分布模式發生明顯改變。在神經元中,SNAT1 的陽性信號明顯減弱,而在一些神經膠質細胞周圍卻出現異常聚集。這一發現表明,SNAT1 蛋白的變化很可能參與了 AD 的病理過程,為后續深入研究 AD 的發病機制提供了重要線索,例如可進一步探究 SNAT1 蛋白變化對神經元氨基酸代謝、神經遞質循環等方面的影響,從而為尋找潛在治療靶點奠定基礎。
(二)帕金森病研究
帕金森病同樣是常見的神經退行性疾病,以黑質多巴胺能神經元進行性退變和路易小體形成等為主要病理特征??蒲腥藛T利用蛋白質印跡(WB)技術,結合 Stressmarq SMC-401 抗體,對帕金森病模型小鼠的腦組織裂解物展開分析。
在實驗過程中,研究人員將小鼠腦組織充分裂解后,獲取蛋白樣本,使用 12% Tris - Glycine 凝膠進行電泳分離蛋白,隨后在 100V 恒壓下轉膜 60 分鐘至 0.2μm 的聚偏二氟乙烯(PVDF)膜上;轉膜完成后,用含有 5% 牛血清白蛋白(BSA)的 Tris 緩沖鹽水吐溫(TBST)溶液封閉膜 1 - 2 小時,以減少非特異性結合;將 SMC-401 抗體按 1µg/ml 的濃度稀釋于封閉液中,在 4℃條件下孵育過夜;之后用 TBST 充分洗滌膜,再與 HRP 標記的二抗孵育,最后通過化學發光法檢測目標條帶。
研究發現,隨著帕金森病病情進展,小鼠腦內特定腦區(如黑質)中 SNAT1 蛋白的表達量逐漸下降,并且蛋白條帶強度與疾病嚴重程度呈現一定相關性。這一結果暗示,SNAT1 蛋白可能在帕金森病神經遞質代謝紊亂過程中扮演重要角色,為科研人員進一步探索帕金森病發病機制,以及開發針對 SNAT1 蛋白的治療策略提供了關鍵的數據支持。
二、代謝性疾病研究中的應用
(一)糖尿病研究
糖尿病作為全球性公共衛生問題,其發病與胰島 β 細胞功能異常密切相關。科研團隊為深入探究 SNAT1 蛋白在胰島 β 細胞中的功能,運用免疫細胞化學 / 免疫熒光(ICC/IF)技術,結合 Stressmarq SMC-401 抗體開展實驗。
研究人員將體外培養的胰島 β 細胞分別置于低糖和高糖環境下處理,之后進行 ICC/IF 染色。具體步驟為:先用 4% 多聚甲醛固定細胞,再進行透膜處理;將 SMC-401 抗體按 1:1000 的比例稀釋后,在 4℃條件下孵育過夜;隨后加入熒光標記的二抗,在適宜條件下孵育,完成標記過程。
實驗結果表明,在高糖環境下,胰島 β 細胞中 SNAT1 的熒光強度明顯增強,并且其在細胞內的定位也發生改變,更多地聚集在細胞膜附近。這一現象提示,高糖刺激可能對 SNAT1 的表達和定位產生影響,進而推測其可能參與調控胰島 β 細胞的氨基酸代謝和胰島素分泌過程。后續研究可圍繞這一發現,深入探討 SNAT1 蛋白在糖尿病發病機制中的具體作用,為糖尿病治療提供新的理論依據和潛在靶點。
(二)肥胖癥研究
肥胖癥不僅影響個體健康,還與多種慢性疾病密切相關??蒲腥藛T采用流式細胞術(FCM),結合 Stressmarq SMC-401 抗體,對脂肪組織中的巨噬細胞展開分析,以探究 SNAT1 在肥胖癥發生發展中的作用。
研究人員分別從肥胖小鼠和正常小鼠的脂肪組織中分離巨噬細胞,將 SMC-401 抗體標記在巨噬細胞表面,通過流式細胞儀檢測細胞表面 SNAT1 陽性細胞比例。實驗結果顯示,肥胖小鼠脂肪組織巨噬細胞表面的 SNAT1 陽性細胞比例顯著高于正常小鼠。這一結果表明,SNAT1 可能在肥胖相關的炎癥反應和脂肪代謝調節過程中發揮重要作用,為科研人員進一步研究肥胖癥的發病機制,以及開發針對 SNAT1 的干預措施提供了重要線索,例如可研究通過調節 SNAT1 表達來改善肥胖相關的代謝紊亂和炎癥狀態。
三、腫瘤研究中的應用
(一)腫瘤細胞增殖和轉移機制研究
腫瘤的增殖和轉移是導致患者死亡的重要原因,深入探究其機制對于腫瘤治療至關重要。科研人員以乳腺癌細胞系為研究對象,利用免疫沉淀(IP)技術配合 Stressmarq SMC-401 抗體,深入研究腫瘤細胞增殖和轉移機制。
研究人員先收集乳腺癌細胞系,裂解細胞獲取蛋白復合物,將 SMC-401 抗體與 Protein A/G 磁珠偶聯,形成抗體 - 磁珠復合物;將復合物加入細胞裂解液中,在 4℃條件下緩慢搖晃孵育數小時,使抗體與目標蛋白充分結合;通過磁力架分離磁珠,將結合有目標蛋白及相關相互作用蛋白的復合物洗脫下來,隨后利用質譜分析鑒定與 SNAT1 相互作用的蛋白。
實驗發現,SNAT1 與一些參與細胞增殖和遷移調控的蛋白存在相互作用關系。進一步通過基因干擾技術,降低乳腺癌細胞中 SNAT1 的表達,發現細胞的增殖能力和遷移能力均受到顯著抑制。這一研究揭示了 SNAT1 在乳腺癌發展過程中的潛在作用機制,為乳腺癌治療靶點的探索提供了全新方向,例如可研發針對 SNAT1 及其相互作用蛋白的抑制劑,用于抑制腫瘤細胞的增殖和轉移。
(二)腫瘤微環境研究
腫瘤微環境對腫瘤的發生、發展和轉移具有重要影響??蒲腥藛T利用 IHC 技術,借助 Stressmarq SMC-401 抗體,對腫瘤組織切片進行染色,以觀察 SNAT1 在腫瘤細胞和腫瘤相關巨噬細胞中的表達情況,從而深入了解腫瘤微環境。
研究人員對腫瘤組織切片進行常規的固定、抗原修復、封閉等處理后,將 SMC-401 抗體按合適比例稀釋進行孵育,后續采用標準的 IHC 流程完成染色。實驗結果顯示,在腫瘤組織中,SNAT1 在腫瘤細胞和腫瘤相關巨噬細胞中均呈現高表達,并且其表達水平與腫瘤的血管生成和免疫逃逸密切相關。這一發現為科研人員理解腫瘤微環境中營養物質代謝和免疫調節機制提供了重要依據,有助于開發針對腫瘤微環境中 SNAT1 相關通路的治療策略,例如通過調節 SNAT1 表達來影響腫瘤血管生成和免疫細胞功能,進而抑制腫瘤的發展。
Stressmarq SMC-401 產品在多個重要科研領域展現出強大的應用潛力,通過精準檢測 SNAT1 蛋白,為疾病機制研究和治療靶點探索提供了關鍵支持。隨著生命科學研究的不斷深入,相信該產品將在更多研究方向發揮重要作用,助力科研人員攻克更多生命科學難題。
相關產品
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。