DMEM培養基(Dulbecco's Modified Eagle Medium)是一種廣泛應用于細胞培養領域的基礎培養基,其特點可歸納如下:
一、營養均衡且濃度高
氨基酸含量豐富:DMEM培養基中的氨基酸含量為依格爾培養基(EMEM)的2倍,且含有非必需氨基酸(如甘氨酸),為細胞提供充足的蛋白質合成原料。
維生素含量高:維生素含量為EMEM的4倍,參與細胞代謝的多種關鍵途徑,如能量轉換、抗氧化反應等。
碳水化合物與無機鹽:含有高濃度的葡萄糖(高糖型達4500mg/L,低糖型為1000mg/L)、無機鹽(如鈣、鎂、鐵離子)及微量元素,滿足細胞生長和代謝的多樣化需求。
二、pH值穩定
緩沖系統:DMEM培養基使用碳酸氫鈉作為緩沖系統,配合5%的CO?氣體環境,可有效維持培養基的pH值在7.2至7.4之間,這一范圍對大多數哺乳動物細胞的生長至關重要。
丙酮酸與乳酸:部分配方中添加丙酮酸和乳酸作為輔助緩沖劑,進一步增強pH穩定性,適用于開放式培養系統(如培養皿)。
三、類型多樣,適用性廣
高糖型DMEM:
葡萄糖濃度高:提供更高能量代謝支持,促進癌細胞、神經元等高代謝需求細胞的貼壁與增殖。
適用場景:適用于生長較快、附著較困難的腫瘤細胞(如骨髓瘤細胞)、轉化細胞及高密度懸浮細胞培養。
低糖型DMEM:
葡萄糖濃度低:避免過量糖代謝壓力,降低乳酸積累,延長培養基更換周期。
適用場景:適用于原代成纖維細胞、血管內皮細胞等常規培養,以及需要控制糖代謝的實驗。
特殊配方:
無丙酮酸鈉版本:適用于對丙酮酸敏感的細胞或實驗。
無谷氨酰胺版本:滿足特定實驗需求,如谷氨酰胺合成酶缺陷細胞的培養。
含HEPES版本:增強緩沖能力,減少CO?依賴,適用于密閉培養環境(如培養瓶)。
四、成分可調節,靈活性高
補充物添加:DMEM培養基本身缺乏蛋白質、脂質和生長因子等必需成分,需通過添加胎牛血清(FBS)、生長因子、抗生素等補充物形成完整培養體系。常規培養通常需添加10%的FBS。
定制化配方:研究人員可根據實驗需求選擇合適的DMEM配方,或調整補充物種類和濃度,以滿足特定細胞類型或實驗條件的要求。
五、質量穩定,可靠性高
嚴格質量控制:DMEM培養基經過嚴格的質量控制和優化,確保成分穩定、無菌、無內毒素,為細胞培養提供可靠的基礎。
物理性質穩定:過濾除菌后呈淺黃色澄清液體,內毒素含量≤1 EU/mL,滲透壓在295~340 mOsm/kg·H?O之間,符合細胞生長的理想條件。
六、應用領域廣泛
基礎研究:支持原代細胞、干細胞、轉化細胞等多種哺乳動物細胞的培養,用于細胞生物學、分子生物學等基礎研究。
生物醫藥生產:作為病毒宿主細胞(如Vero細胞)的擴增基質,用于疫苗生產;支持單克隆抗體、重組蛋白等生物藥物的生產。
藥物篩選與毒理學研究:評估化合物對細胞的影響,為藥物研發提供實驗基礎。
基因編輯與轉染實驗:確保細胞在基因操作前后的良好生長狀態,提高實驗成功率。
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