薄層色譜點樣儀是一種常用的分離和分析技術,而點樣是影響實驗結果的關鍵步驟之一。如果點樣不均勻,可能導致斑點擴散、拖尾或分離效果差,影響分析準確性。本手冊將詳細介紹薄層色譜點樣儀點樣不均勻的可能原因及解決方法,幫助實驗人員快速排查故障。
1.點樣不均勻的常見表現
-斑點大小不一
-點樣位置偏移
-斑點擴散或拖尾
-點樣量不一致
2.可能原因及解決方案
(1)點樣針或毛細管堵塞
現象:點樣液滴不出或出液不穩定。
原因:
-樣品溶液含有顆粒或雜質
-點樣針/毛細管未清潔干凈
-溶劑揮發導致針尖堵塞
解決方法:
-用適當溶劑(如甲醇、丙酮)清洗點樣針
-使用0.22μm濾膜過濾樣品溶液
-定期檢查針頭,必要時更換
(2)點樣壓力或速度不穩定
現象:點樣量忽大忽小,斑點形狀不規則。
原因:
-氣壓調節不當(自動點樣儀)
-手動點樣時力度不均
-點樣儀泵或電磁閥故障
解決方法:
-檢查氣壓是否穩定,調整至合適壓力
-手動點樣時保持勻速、垂直點樣
-如為自動點樣儀,檢查泵和電磁閥是否正常工作
(3)點樣高度不一致
現象:斑點大小不一,部分斑點擴散嚴重。
原因:
-點樣針與薄層板距離不合適
-點樣儀Z軸高度未校準
解決方法:
-調整點樣針高度,使其輕觸薄層板但不壓彎
-使用校準工具檢查點樣儀Z軸位置
(4)薄層板表面問題
現象:點樣后斑點擴散不均或吸附不良。
原因:
-薄層板受潮或污染
-固定相(如硅膠)不均勻
-點樣前未活化薄層板
解決方法:
-使用前將薄層板在105°C活化30分鐘
-檢查薄層板是否均勻,避免使用破損板
-確保實驗環境濕度適宜(可放置干燥劑)
(5)樣品溶劑選擇不當
現象:點樣后斑點擴散過快或無法形成清晰斑點。
原因:
-溶劑極性過大,導致快速擴散
-溶劑揮發過快,導致點樣不均勻
解決方法:
-選擇合適極性的溶劑(如甲醇、乙酸乙酯等)
-可加入少量高沸點溶劑(如DMF)減緩揮發
(6)點樣儀機械故障
現象:點樣位置偏移或重復性差。
原因:
-點樣儀導軌或傳動裝置磨損
-電機或步進驅動器故障
-軟件控制參數錯誤
解決方法:
-檢查導軌潤滑情況,必要時清潔并涂抹潤滑油
-校準電機步進參數
-重新設置點樣程序,確保點樣坐標正確
3.日常維護建議
1.定期清潔點樣針:每次使用后用溶劑沖洗,避免殘留堵塞。
2.校準儀器:每周檢查點樣高度、氣壓等參數。
3.優化點樣條件:調整合適的溶劑、點樣量和速度。
4.檢查薄層板質量:確保無污染、無受潮。
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