α-Bungarotoxin, CF®543技術(shù)參數(shù)與實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)
【產(chǎn)品基本信息】
試劑名稱:α-Bungarotoxin, CF®543
激發(fā)波長:543nm
發(fā)射波長:563nm
外觀性狀:根據(jù)分子量決定,固體或者液體。
溶解性:溶于水等部分有機(jī)溶液
供應(yīng)商:西安凱新生物科技
規(guī)格:0.5mg,1mg,2mg
純度:≥95%
儲(chǔ)存條件:-10 到 -35 °C,干燥、避光
注意事項(xiàng):現(xiàn)配現(xiàn)用,不可頻繁解凍
【核心功能與應(yīng)用場景】
1.神經(jīng)肌肉接頭受體成像
功能:通過特異性結(jié)合nAChRs,實(shí)現(xiàn)神經(jīng)肌肉接頭處受體分布的高分辨率熒光標(biāo)記,用于研究受體動(dòng)態(tài)變化、突觸可塑性及神經(jīng)退行性研究。
示例:在大鼠骨骼肌切片中,1 μg/mL α-Bungarotoxin, CF®543染色溶液室溫孵育15分鐘,可清晰顯示受體簇狀分布,結(jié)合免疫熒光可同時(shí)標(biāo)記其他突觸蛋白。
2.單分子水平受體檢測
技術(shù):利用熒光標(biāo)記的單分子成像技術(shù),追蹤單個(gè)nAChR分子的運(yùn)動(dòng)軌跡、擴(kuò)散速率及聚集狀態(tài),為研究受體動(dòng)力學(xué)提供工具。
優(yōu)勢:CF®543的優(yōu)異光穩(wěn)定性支持長時(shí)間單分子追蹤,減少光漂白對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。
3.受體親和純化
方法:將生物素化的α-Bungarotoxin與鏈霉親和素磁珠結(jié)合,構(gòu)建親和純化系統(tǒng),從細(xì)胞裂解液中特異性捕獲nAChRs,用于受體結(jié)構(gòu)解析或功能驗(yàn)證。
應(yīng)用:結(jié)合質(zhì)譜分析,可鑒定受體亞基組成及翻譯后修飾位點(diǎn)。
【技術(shù)參數(shù)與實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)】
1.溶解性與儲(chǔ)存條件
溶解性:溶于部分有機(jī)溶劑(如DMSO)及水(需優(yōu)化濃度),建議使用新開封的DMSO配制儲(chǔ)備液,避免吸濕影響溶解度。
儲(chǔ)存:-20℃干燥避光保存,避免反復(fù)凍融;工作液建議現(xiàn)用現(xiàn)配,4℃保存不超過6個(gè)月。
2.染色協(xié)議(以大鼠骨骼肌切片為例)
固定:4%多聚甲醛(PBS)室溫固定15分鐘,或甲醇(-20℃)固定5分鐘。
通透:0.1% Triton X-100(PBS)室溫處理10分鐘(甲醇固定切片省略此步)。
染色:1 μg/mL α-Bungarotoxin, CF®543染色溶液覆蓋切片,室溫避光孵育≥15分鐘。
封片:PBS洗滌后,用抗熒光淬滅封片劑封片,-20℃避光儲(chǔ)存。
3.濃度優(yōu)化
儲(chǔ)備液配制:根據(jù)分子量(7984.3 Da)計(jì)算,1 mg毒素可配制125.2 μL 1 mM儲(chǔ)備液(DMSO溶解)。
工作濃度:通常1 μg/mL(約125 nM)用于染色,需根據(jù)實(shí)驗(yàn)體系調(diào)整。
【有關(guān)化學(xué)試劑】
DBCO-PEG-OPSS,OPSS-PEG-DBCO,MW:2000
Bis-Biotin-PEG23,雙生物素-PEG23
293298-36-9
Cholera Toxin Subunit B, CF 405M
Cholera Toxin Subunit B, CF 647
DSPE-PEG-NBD,NBD-PEG-DSPE,MW:1000
DSPE-PEG-TPP,TPP-PEG-DSPE,MW:1000
Azdio-PEG-MALeimide
CF 568 SE
CF 633, Succinimidyl Ester
α-Bungarotoxin, CF 405S
4-Arm PEG-MAL
Poly(ε-caprolactone)-PEG-Poly(ε-caprolactone),MW:20000
HO-PEG-X
Hydroxyl-PEG-X,X-PEG-OH,MW:20000
注:該試劑僅用于科學(xué)研究,不能用于人體實(shí)驗(yàn)等用途。
本文試劑資料由西安凱新生物科技小華編輯整理。
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我公司提供的點(diǎn)擊類化學(xué)試劑包括:DBCO、TCO、Tetrazine、Azide、Alkyne、Auxiliary reagents等。其中DBCO Reagents又包含了與氨基反應(yīng)的,與羧基反應(yīng)的,與生物素交聯(lián)的,與熒光素交聯(lián)的,與PEG交聯(lián)的等等產(chǎn)品。各試劑具有多樣的規(guī)格的包裝,能滿足您各類實(shí)驗(yàn)需求,西安凱新所有員工希望能與您攜手共進(jìn),共創(chuàng)輝煌。
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