超微量分光光度計(jì)作為常用的核酸、蛋白等生物大分子的定量和表征工具，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)和生物制藥等領(lǐng)域，用戶(hù)僅需微量樣品即可快速獲得濃度及吸光度結(jié)果。然而在日常使用中，一些用戶(hù)會(huì)對(duì)測(cè)量結(jié)果有疑慮，尤其是當(dāng)測(cè)量結(jié)果與預(yù)估的結(jié)果出現(xiàn)較大差異，或與使用其他方法的定量結(jié)果有差異時(shí)，用戶(hù)往往會(huì)懷疑設(shè)備出現(xiàn)問(wèn)題或故障。其性能檢查是確保儀器準(zhǔn)確性和可靠性的重要步驟，以下是對(duì)超微量分光光度計(jì)性能檢查的一些建議：

一、檢查前的準(zhǔn)備

1、確保儀器處于穩(wěn)定狀態(tài)：檢查儀器是否放置平穩(wěn)，避免震動(dòng)和干擾。

2、檢查光源：確保光源（如氙氣閃光燈）正常工作，無(wú)閃爍或亮度不均現(xiàn)象。

3、檢查檢測(cè)器：確保檢測(cè)器靈敏度高，能夠準(zhǔn)確檢測(cè)微弱光信號(hào)。

4、校準(zhǔn)儀器：使用標(biāo)準(zhǔn)溶液（如重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液）進(jìn)行校準(zhǔn)，確保儀器測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。

二、性能檢查

1、標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)量

常用的標(biāo)準(zhǔn)品可使用BSA或核酸標(biāo)準(zhǔn)品，可從各試劑廠家購(gòu)買(mǎi)，或使用如BCA定量試劑盒，QUBIT核酸定量試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品。請(qǐng)注意標(biāo)準(zhǔn)品一定要在效期之內(nèi)，且保存得當(dāng)（通常低溫）。也可以使用設(shè)備廠家提供的小分子化合物標(biāo)準(zhǔn)品，如Implen提供的PHP標(biāo)準(zhǔn)品。標(biāo)準(zhǔn)品是有等級(jí)區(qū)分的，通常附帶有檢定證書(shū)的標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)稱(chēng)濃度會(huì)更準(zhǔn)確。    特別指出的是，使用未知濃度的樣品，來(lái)評(píng)估不同設(shè)備的測(cè)量結(jié)果，并以其中一臺(tái)作為基準(zhǔn)，判定另外一臺(tái)的準(zhǔn)確性，是錯(cuò)誤的。

2、重復(fù)性測(cè)量

在缺乏標(biāo)準(zhǔn)品，或標(biāo)準(zhǔn)品由于保存不當(dāng)狀態(tài)已存疑時(shí)，可使用未知濃度樣品做重復(fù)性測(cè)試。這可以判斷設(shè)備的穩(wěn)定性，以排除一些潛在問(wèn)題，如樣品臺(tái)損壞、樣品的非均質(zhì)，成分干擾等。雖然不能確定準(zhǔn)確性誤差，但重復(fù)性很好的設(shè)備，很大幾率是沒(méi)有大問(wèn)題的。當(dāng)然，這需要結(jié)合您的允差要求，綜合考量。

3、梯度稀釋測(cè)量

使用已知濃度或未知濃度的樣品，均可進(jìn)行梯度稀釋測(cè)量，以驗(yàn)證設(shè)備的線性穩(wěn)定性。使用設(shè)備的標(biāo)準(zhǔn)曲線功能可便捷地完成此項(xiàng)測(cè)試，并給出線性回歸。當(dāng)梯度稀釋的R2趨近于1，設(shè)備的線性可滿足廣泛的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)的測(cè)量要求，同時(shí)也可反映設(shè)備的良好狀態(tài)。需要注意的是，梯度稀釋時(shí)一定要選擇定期校準(zhǔn)過(guò)的，準(zhǔn)確性好的移液器，且正確操作。

4、基線穩(wěn)定性測(cè)量

 光源和CCD檢測(cè)器，作為設(shè)備的核心組件，其穩(wěn)定性對(duì)于設(shè)備而言是非常重要的，而基線測(cè)量可以很好地反映這些部件的狀態(tài)。使用水（或空氣）作為空白，并且用水（或空氣）作為樣品，做多次重復(fù)測(cè)量，如果吸光值的漂移很小，通常可反映設(shè)備的光學(xué)系統(tǒng)組件狀態(tài)正常。

三、性能檢查后的處理

1、記錄檢查結(jié)果：詳細(xì)記錄各項(xiàng)性能檢查的結(jié)果和數(shù)據(jù)，以便后續(xù)分析和比較。

2、分析檢查結(jié)果：對(duì)檢查結(jié)果進(jìn)行分析和評(píng)估，判斷儀器是否滿足使用要求。

3、調(diào)整或校準(zhǔn)儀器：根據(jù)檢查結(jié)果，對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)整或校準(zhǔn)，確保儀器處于最佳工作狀態(tài)。

4、制定維護(hù)計(jì)劃：根據(jù)儀器的使用情況和性能檢查結(jié)果，制定定期維護(hù)和保養(yǎng)計(jì)劃，延長(zhǎng)儀器的使用壽命和保持其準(zhǔn)確性。

超微量分光光度計(jì)的性能檢查是確保其準(zhǔn)確性和可靠性的重要步驟。通過(guò)全面的性能檢查，可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)并解決問(wèn)題，確保儀器在科研和實(shí)驗(yàn)中的準(zhǔn)確性和可靠性。