一、背景

青霉素酶制備培養基用于培養高產青霉素酶蠟狀芽孢桿菌的專用培養基，主要用于高產青霉素酶蠟狀芽孢桿菌的選擇培養和青霉素酶發酵制備。

二、用法

稱取本品31.9g,另取甘油50g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝于500ml錐形瓶內,每瓶80ml,115℃高壓滅菌30分鐘,備用。

青霉素酶又稱β-內酰胺酶（β-lactamase，EC 3.5.2.6），可水解β-內酰胺類抗生素。

它采用基因重組技術構建了β-內酰胺酶高效表達菌株，通過色譜層析技術獲得重組β-內酰酶（TEM1），具有純度高、活性高、專一性強等特點。本品可以有效的分解β-內酰胺類抗生素，包括青霉素G；氨基青霉素類，如氨芐西林、阿莫西林、匹氨西林；羧基青霉素類，如羧芐西林、替卡西林等；及脲基青霉素類，如呋芐西林、美洛西林等。

青霉素酶是一種作用于青霉素的β-內酰胺環，使青霉素變成無抗菌活性的青霉酮酸的酶。多種青霉素耐藥細菌能產生此酶。如金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的青霉素耐藥菌株和蠟狀芽孢桿菌(Bacilluscereus)的青霉素耐藥株等。

青霉素酶是一種醫療用酶，適用于治療一般青霉素的過敏反應，也可用于過敏性休克或嚴重青霉素過敏反應癥患者的輔助治療。蠟狀芽孢桿菌可作為此酶的生產菌種。

三、應用

用于青霉素酶的制備及研究應用研究：

β-內酰胺酶是一類能水解β-內酰胺類抗生素的水解酶,目前已發現200多種。根據β-內酰胺酶的結構和水解產物不同,被分為A、B、C、D四類,其中青霉素酶屬于β-內酰胺酶的A類。

該酶的主要特點是可以水解青霉素、頭孢菌素、肟類β-內酰胺、氯唑西林、羧芐西林和碳青霉烯類等抗生素,其活性可被克拉維酸所抑制。

目前青霉素酶主要應用于抗生素藥物的無菌檢驗,也有用于青霉素酶生物傳感器以及以青霉素酶為標記的ELISA的報道,但都屬于試劑級產品,尚無工業級產品及應用的報道。

本研究主要成果如下:

（1）以蠟狀芽孢桿菌kd-01為出發菌株,經紫外誘變和指示菌生長譜法篩選,得到一株高產青霉素酶的菌株,命名為kd-02,使發酵單位由1 035 000U/mL提高到3 016000U/mL,提高了291.4%。

（2）經發酵工藝再次優化,在10%種子接種量,30℃搖瓶發酵溫度,初始發酵溶液pH7.0～7.2,裝料比為50mL/250mL進行發酵,230 r/min的條件下,發酵單位平均為7 500 000U/mL,達7 588 000U/mL。

（3）研究了無菌酶制劑的制備工藝,發酵酶液經0.22μm膜精濾達到了無菌要求,其過濾收率為92.3%。

（4）研究了酶制劑的穩定性,25℃以下保存1個月,其酶活穩定在92%以上。

（5）研究了上述無菌酶制劑在青霉素菌渣無害化處理中的應用,針對某公司提供的菌渣其平均殘留為2 179 U/g,約為1.3 mg/g。在青霉素酶活與青霉素效價比為3:1的條件下,37℃,1h可以去除其中的青霉素。

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