紫外可見分光光度計是分析化學中的重要工具,其使用細節直接影響數據的準確性和儀器壽命。以下從使用前準備、校準與測量操作、環境控制、日常維護等方面展開,闡述其關鍵細節。
一、使用前準備
1. 儀器預熱與自檢:
- 開機前需確保電源接地良好,并檢查樣品室是否存在遺留的防潮劑或雜物。
- 預熱時間因型號而異,一般為15-30分鐘,以確保光源穩定和儀器自檢完成。
2. 環境條件控制:
- 溫度:建議保持在5-35℃,避免儀器內部過熱加速元件老化。
- 濕度:需低于85%,高濕度易導致光學部件發霉、金屬部件銹蝕。
- 防塵與腐蝕氣體:避免實驗室環境中存在腐蝕性氣體或過多塵埃,定期清潔儀器表面及樣品室。
二、校準與測量操作
1. 波長校準與零點校正:
- 使用空白溶液(如溶劑或參比液)進行零點校準,確保吸光度歸零(0.000A)或透光率滿度(100%T)。
- 手動設置波長時需匹配樣品的吸收峰,避免波長漂移導致誤差。
2. 測量操作步驟:
- 裝入比色皿:選擇石英材質用于紫外區(190-400nm),玻璃或塑料材質適用于可見光區。
- 空白校正:將參比溶液推入光路,按“AUTO-ZERO”或“100%T”鍵,直至顯示100%T或0.000A。
- 樣品測試:更換待測樣品,記錄吸光度或透光率值,需確保比色皿外壁無液滴殘留。
三、樣品與比色皿處理
1. 比色皿選擇與清潔:
- 紫外區需用石英比色皿,可見區可選用玻璃或塑料材質。
- 測量前后需用蒸餾水沖洗比色皿,若有殘留可用無水乙醇浸泡,禁用粗糙紙張擦拭以免劃傷。
2. 樣品制備:
- 吸光度應控制在0.1-1.0范圍內,濃度過高可能導致光源飽和,過低則信號弱。
- 避免樣品與比色皿內壁接觸,必要時用移液器精確稀釋。
四、環境干擾與維護
1. 減少振動與溫度波動:
- 儀器需放置于平穩臺面,避免震動導致燈絲斷裂或光路偏移。
- 內置溫控系統的儀器仍需注意環境溫度變化,建議實驗室配置恒溫設備。
2. 定期維護與故障處理:
- 清潔光學系統:定期用擦鏡紙清潔透鏡,檢查光路是否偏移,必要時由工程師校準。
- 更換光源:氘燈(紫外區)和鎢燈(可見區)需按廠商建議周期更換,避免亮度衰減影響數據。
- 除濕處理:若儀器受潮,可用電吹風低溫干燥光電管暗盒,并更換干燥劑。
五、常見問題與應對
1. 透光率無法調至100%:檢查光源是否老化或波長校準偏差,需重新調整或更換燈泡。
2. 測量重復性差:可能因環境溫度波動、比色皿污染或儀器未充分預熱,需逐一排查。
3. 光路堵塞:若樣品室漏液導致光學部件污染,需拆卸清潔并干燥處理。
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