IHC常見問題分析及處理
來源:上海研謹生物科技有限公司
2025年06月12日 14:36
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問題 | 原因 | 建議 |
結果中顯色過深 | 一抗濃度過高或孵育時間過長 | 降低一抗濃度或減少孵育時間 |
孵育溫度過高 | 室溫或4℃孵育 |
辣根標記二抗教育時間長 | 縮短時間 |
IHS結果中非常異色顯著 | 石蠟切片脫蠟不徹底 | 延長脫蠟時間 |
操作過程中沖洗不充分 | 增加沖洗的次數與沖洗時間 |
組織富含內源性的生物素與過氧化物酶 | 使用相關試劑進行封閉 |
發生抗原異位 |
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蛋白封閉不充分 | 增加蛋白封閉時間 |
IHS弱結果中顯色強 | 抵抗力過低或教育時間過短 | 增加一抗濃度或延長孵育時間 |
試劑超過保質期 | 實驗前確認試劑的保質期 |
操作過程沖洗過度 | 適度沖洗 |
IHS結果中無染色 | 組織中無目的抗原的表達 |
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一抗種屬來源與二抗不匹配 | 實驗前確認一抗的種屬來源 |
顯色物質與辣根系統不匹配 | 實驗前確認顯色體系 |
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