二手賽默飛 7500 熒光定量 PCR 儀介紹與應用解析

一、設備概述

熒光定量聚合酶鏈式反應（qPCR）技術，作為分子生物學領域的一項重要工具，廣泛應用于基因定量、病原體檢測、基因表達分析、轉基因檢測以及微生物監測等多個領域。賽默飛世爾科技（Thermo Fisher Scientific）推出的 Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System（以下簡稱 7500 系統）是一款經典的熒光定量 PCR 平臺，憑借其模塊設計和兼容性，在多個實驗室工作流程中持續發揮作用。

作為一款被廣泛應用并已有多年市場歷史的儀器型號，7500 系統的二手市場活躍，越來越多的實驗室基于預算、維護可持續性和培訓目的考慮，在配置PCR平臺時選擇質量良好、功能齊全的二手設備。

二、設備結構與核心組成

賽默飛 7500 系統采用封閉式臺式主機結構，由以下幾個主要部分組成：

1. 光學系統

內置 5 色光學檢測系統，支持多重熒光通道檢測，包括 FAM、VIC、ROX、TAMRA、SYBR Green 等常用染料。

• 激發光源：高亮度 LED

• 檢測器：CCD 相機

• 濾光片組合：固定濾光系統，自動完成多通道讀取

• 優點：減少光路移動部件，增強設備整體穩定性和耐用性

2. 熱循環模塊

采用 Peltier 熱電元件，支持標準 96 孔板（0.2 mL 反應體系）

• 升溫速度：約 1.6℃/s

• 溫控精度：±0.25℃

• 溫度均一性：±0.5℃（典型）

• 熱蓋溫度：可調（默認 105℃），用于防止反應液揮發

3. 軟件系統

配套使用 SDS 軟件（v1.4 及以上），具備以下功能：

• 實時擴增曲線繪制

• Ct 值自動計算

• 相對定量/絕對定量分析

• 融解曲線分析（SYBR Green 應用）

• 多重反應設置與自動數據分組

4. 通信接口

• USB 接口用于數據導出

• 可通過串口/局域網連接上位機，實現遠程操作或集群管理（部分版本支持）

三、二手設備市場背景與應用場景

在市場使用年限較長的 PCR 系統中，7500 系列因其功能實用、性能穩定而在二手設備中具有一定保有率。其適用于以下場景：

• 中小型科研實驗室：預算受限但需要搭建完整分子實驗平臺

• 醫學檢驗科室：病原體檢測與基因分型項目需要可快速部署的儀器

• 教學平臺：高校生命科學課程實驗實訓需求

• 企業質檢與研發：食品安全、農殘檢測、種子檢驗等環節的分子檢驗

四、技術參數與功能概覽

五、設備使用流程與操作簡要

1. 樣本準備與反應體系設定

• 樣本體系通常為 10–25 µL，包括引物、探針、模板 DNA、Master Mix

• 加樣至96孔板后，封板膜密封，避免蒸發

• 插入熱蓋前確保無氣泡、板底干凈整潔

2. 程序設置

• 打開軟件，設置熱循環參數、熒光檢測通道、讀取模式（連續/分段）

• 設置實驗組與標準曲線/參考樣本位置

3. 數據采集

• 實驗過程中實時采集熒光信號

• 系統自動生成擴增曲線、標準曲線、Ct 值等結果

4. 數據分析

• 采用 SDS 軟件進行背景扣除、基線校正、ΔΔCt 法分析等

• 可視化導出結果，用于報告生成與歸檔管理

六、二手設備的優勢與注意事項

優勢

1. 成本降低：較新機購買價格下降明顯，適合預算有限實驗室

2. 兼容性強：可使用現有 ABI 探針試劑體系，無需額外改造

3. 維修配件豐富：配件供應渠道多，維修維護便捷

4. 適配舊軟件：對于依賴舊數據體系（如 SDS 1.4）的實驗室，有一定操作連續性

注意事項

1. 設備來源確認：優選來自正規實驗室或具有完整溯源記錄的設備

2. 運行時長審查：檢查累計運行時間、熱蓋壽命、光學系統狀態

3. 校準記錄：查看最近一次溫控、光學系統的校準與驗證文檔

4. 軟件兼容性：確認設備是否能連接當前操作系統版本的計算機

5. 保修與售后：建議與具有技術支持能力的供應商合作，明確責任界限

七、設備升級與兼容性擴展

盡管 7500 并非最新型號，但其仍可在一定范圍內通過軟件升級、附件配置擴展功能。例如：

• 更換主控電腦：連接 Windows 10 系統的工作站并安裝兼容驅動

• 軟件升級：部分版本可升級至 SDS v1.5.1，提高兼容性與數據處理能力

• 溫控模塊調校：通過熱循環模塊溫度校正工具提升熱均一性

此外，對于有特殊需求的實驗室（如要求自動化加樣平臺對接），7500 也可與一些第三方機械臂配合使用，但需額外配置適配接口。

八、常見問題與維護建議

日常維護建議：

• 每次實驗后及時清理熱蓋、樣本殘留

• 每月檢查一次光學系統與濾光片通透性

• 每季度進行一次熱循環均一性測試

• 每半年進行溫控校準與光源強度評估

九、典型應用案例

1. 新冠病毒核酸篩查（RT-qPCR）
   2020年以后，許多實驗室使用7500系統搭建核酸篩查平臺，用于E基因、N基因的實時檢測，檢測靈敏度可達10拷貝/反應。

2. 教學科研中的定量PCR教學實驗
   高校分子生物學與基因工程課程常用該系統進行SYBR Green基礎實驗教學，如β-actin、GAPDH等內參基因表達定量分析。

3. 臨床樣本基因表達分析
   醫院檢驗科開展腫瘤標志物相關基因表達研究，利用7500平臺做qPCR前瞻性研究，形成術后評估模型。

十、結語

總的來看，Applied Biosystems 7500 熒光定量 PCR 儀雖然已非市場上最新型號，但在功能、兼容性、耐用性以及用戶群體上依然保持穩定表現。對于需要搭建經濟型分子檢測平臺的實驗室而言，采購經過檢測、保養完善的二手 7500 儀器，不失為一種合理的選擇。

在選購過程中，用戶應重點關注設備來源、使用年限、運行記錄、光學與溫控系統的當前狀態，以及配套軟件與售后支持等因素，確保設備投入使用后能持續提供穩定、可靠的數據支持。在規范管理與定期維護的前提下，二手賽默飛7500系統依然能夠在多個應用場景中完成多樣化的分子生物學任務。