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辣根過氧化物酶HRP標記親和純化山羊抗人IgG(H+L)二抗:親和純化,高靈敏度

來源:武漢艾美捷科技有限公司   2025年06月04日 16:13  

HRPHorseradish Peroxidase,辣根過氧化物酶)是一種分子量達44000的糖蛋白,由無色的酶蛋白和深棕色的鐵卟啉結合而成,通常來源于辣根植物中,是臨床檢驗試劑中的常用酶。辣根過氧化物酶(Horseradish PeroxidaseHRP)比活性高,穩定,分子量小,純酶容易制備,所以常用。HRP廣泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結合而成的糖蛋 白,糖含量18%。由于其易于提取、價格相對低廉,同時性質穩定,耐熱及有機溶劑的作用,與抗原或抗體偶聯后,活性很少受損失,因此是迄今為止在免疫學中應用最為廣泛的一種標記用酶。HRP的催化底物包括色原底物、化學發光底物等,其中常用的色原底物有鄰苯二胺(OPD)、22-吖嗪-3-乙酰苯 基噻唑磺酸-6)(ABTS)、四甲基聯苯胺(TMB)和4-氨基安替比林:苯酚耦聯底物對等;而化學發光底物則包括Luminol/增強劑等系統。

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艾美捷辣根過氧化物酶HRP標記親和純化山羊抗人IgG(H+L)二抗

貨號:109-035-003

物理狀態:凍干固體

純度:抗體通過免疫親和層析從抗血清中純化,使用與瓊脂糖珠偶聯的抗原進行純化。

緩沖液:0.01M 磷酸鈉,0.25M 氯化鈉,pH 7.6

穩定劑:15 mg/ml 牛血清白蛋白(無IgG,無蛋白酶)

防腐劑:無(警告:使用疊d化鈉作為防腐劑將顯著抑制辣根過氧化物酶的酶活性。)

免疫原:人IgG

來源宿主:山羊

 

建議的工作濃度或稀釋范圍:

免疫組織化學/細胞化學:1:500 - 1:5,000

使用比色底物的ELISAWestern blot1:5,000 - 1:100,000

使用ECL底物的Western blot1:10,000 - 1:200,000

 

稀釋因子以范圍形式呈現,因為最佳稀釋度是多種因素的函數,例如抗原密度、通透性等。實際使用的稀釋度必須通過實驗確定。

偶聯物:辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP

辣根過氧化物酶(HRP)偶聯物是通過改良的NakaneKawaoi方法制備的(《組織化學與細胞化學雜志》1974年,第22卷,第1084頁)。過氧化物酶偶聯物常用于免疫組織化學、Western blotELISA。可用于檢測辣根過氧化物酶抗原或放大含有HRP的試劑信號的抗辣根過氧化物酶及其偶聯物。對于哺乳動物細胞的免疫染色,使用抗辣根過氧化物酶的一個優勢是背景較低,因為該抗體不會識別這些細胞中存在的內源性類過氧化物酶。

反應性:該山羊抗人二抗與人IgG分子有特異性反應,與其它人免疫球蛋白(包括IgMIgEIgDIgA等)的輕鏈有交叉反應。該二抗與血清內非免疫球蛋白無交叉反應,但可能與其它種屬的免疫球蛋白有交叉反應。

儲存與復溶:將凍干固體儲存在2-8°C。按照產品說明書指示的體積用去離子水復溶,如果溶液不澄清,可以離心。在使用當天準備工作液。產品作為未稀釋的液體在2-8°C下可穩定保存約6周。

長期儲存:復溶后,分裝并置于-70°C或更低溫度下冷凍保存。避免反復凍融。或者,加入等體積的甘油(ACS級或更優),使最終濃度達到50%,并以液體形式在-20°C下保存。

有效期:從復溶日期起一年。如果測試結果符合預期用途,有效期可以延長。  


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