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應用Corning淋巴細胞無血清培養(yǎng)基KBM 591擴增T細胞
免疫細胞療法在治療多種疾病包括腫瘤方面具有巨大的前景，免疫細胞種類包括自體CAR-T、通用型CAR-T、多種來源的NK細胞，以及來源于腫瘤組織的TIL等。這些免疫療法應用需要免疫細胞的離體擴增到高細胞密度，同時不會損失相應細胞表型和功能。
Corning淋巴細胞無血清培養(yǎng)基KBM591（Corning 88-591-CM，以下簡稱為Corning 591培養(yǎng)基）支持在不同激活和擴增條件下（包括基因修飾方案）對各種T細胞群體進行體外擴增和培養(yǎng)，并且適用于不添加自體血漿的多種免疫細胞培養(yǎng)，包括T細胞、NK細胞等。
Corning 591擴增T細胞能力
對于T細胞的增殖，如圖1所示，起始量為2 x 106個T細胞經(jīng)過CD3/CD28磁珠激活后，分別在Corning 591培養(yǎng)基及其他品牌培養(yǎng)14天，其中培養(yǎng)在Corning 591培養(yǎng)基中的T細胞在14天培養(yǎng)后擴增了接近300倍，總細胞量接近6 x 108個細胞，顯著高于其他品牌培養(yǎng)基中所獲得的細胞總量。
利用流式細胞術(shù)對所得細胞的表型進行分析。結(jié)果顯示，培養(yǎng)在Corning 591培養(yǎng)基及品牌2培養(yǎng)基中的細胞CD3+/CD8+比例高于其他品牌（表1）。
圖1. 從PBMC分離的T細胞在不同培養(yǎng)基中培養(yǎng)14天的生長水平
表1 在不同培養(yǎng)基中培養(yǎng)后T細胞的擴增倍數(shù)、活力及表型分析
Corning 591支持不同來源T細胞擴增
我們使用隨機來源的T細胞在Corning 591培養(yǎng)基中使用不同的起始細胞量進行擴增。供體1和供體2來源的T細胞，經(jīng)過磁珠活化后在Corning 591培養(yǎng)基及品牌1培養(yǎng)基種培養(yǎng)，起始培養(yǎng)細胞數(shù)分別為2 x 106（供體1）和1 x 106（供體2）。經(jīng)過14天培養(yǎng)，供體1的PBMC分離的T細胞在Corning 591培養(yǎng)基中的擴增倍數(shù)約為300倍；供體2的PBMC分離的T細胞在Corning 591培養(yǎng)基中培養(yǎng)至12天時擴增倍數(shù)即達到了275倍（圖2，圖3）。由此可見，對于不同供體來源的PBMC，以及不同的起始培養(yǎng)細胞量，Corning 591培養(yǎng)基均能夠支持T細胞的迅速擴增。
圖2. 不同來源T細胞在Corning 591培養(yǎng)基中的生長水平
圖3. 不同來源T細胞在培養(yǎng)終點時的擴增倍數(shù)
Corning淋巴細胞無血清培養(yǎng)基591可以滿足無血清條件下大量擴增T細胞。
在Corning淋巴細胞無血清培養(yǎng)基591中不同供體來源的T細胞擴增倍數(shù)相較競品培養(yǎng)基高出近30%。
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