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BioProE細(xì)胞凍存液(不含蛋白、DMSO和血清)使用方法

來源:上海徠同生物科技有限公司   2025年05月22日 09:52  

BioProE細(xì)胞凍存液(不含蛋白、DMSO和血清)使用方法

BioProE細(xì)胞凍存液基于控冰凍存技術(shù),由明確化學(xué)成分組成,不含有胎牛血清和動物源成分、DMSO、和其他蛋白質(zhì)類物質(zhì)。自主研發(fā)控冰保護成分能夠使細(xì)胞復(fù)蘇后存活率達到90%以上。目前已驗證的常用細(xì)胞系包括CHOHEK 293NS-15637A549HUH7HepG2VEROMDCK293Tmarc-145pk-15。也可用于常見原代細(xì)胞的冷凍保存。

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細(xì)胞凍存步驟

1、常規(guī)方法收集對數(shù)生長期且細(xì)胞活率大于90%的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞置于離心管中。

2、根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細(xì)胞數(shù)。

3、將離心管放入離心機中以1,000rpm的轉(zhuǎn)速離心5分鐘。離心后吸棄上清液,保留細(xì)胞沉淀。

4、加入1-2mL的細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度約為 5×105 -1×107 /ml。輕柔地混勻細(xì)胞,制成細(xì)胞混合液。

5、分裝于已標(biāo)記的凍存管中。

6、直接放入-80℃超低溫冰箱中,可保存一年。

7、如果想長期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天時間,方可移至液氮罐中保存。

 

凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟

1、從-80℃冰箱或液氮中取出凍存的細(xì)胞,立即置于37℃水浴鍋中快速融化。

2、待凍存管中的細(xì)胞混合液wan全融化后轉(zhuǎn)移到無菌離心管中,立即加入等體積的細(xì)胞wan全培養(yǎng)基與細(xì)胞混合,1,000rpm離心5分鐘,移除上清液,收集細(xì)胞沉淀。

3、加入適量的wan全培養(yǎng)基,沿著管壁緩緩加入細(xì)胞沉淀中,輕柔混勻,將混勻好的細(xì)胞移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。

4、鏡檢觀察,待細(xì)胞狀態(tài)恢復(fù)后可進行其他研究或者培養(yǎng)處理。

 

 

 


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