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細胞凍存技術

來源:上海徠同生物科技有限公司   2025年05月22日 09:39  

細胞凍存技術

細胞凍存是細胞培養實驗室常規操作,通過在低溫條件下抑制細胞的新陳代謝和生長,從而實現長期保存細胞的目的。一般有以下情況時我們會采用細胞凍存技術,例如,

1、細胞株需要長期保存;

2、為了規避污染風險,將F0或者F1細胞進行凍存,即使目前傳代的細胞受到污染都能夠有新鮮細胞使用;

3、隨著細胞傳代次數逐漸增加,細胞會發生突變,為了保證前后實驗結果的一致性,可以使用同樣代次細胞;

4、細胞功能和特性研究時,細胞凍存可以保證細胞質量;

5、為了建立細胞資源庫,需要對細胞進行凍存,以方便后續科研研究;

6、細胞治療項目中為了保證項目的延續性,凍存細胞可以持續穩定的供應。

由此可見凍存細胞非常重要。

實驗室常見凍存細胞多采用90%胎牛血清和10%DMSO,其次為70%DMEM20%胎牛血清和10%DMSO。其中胎牛血清含有豐富的蛋白質和生長因子,可以為細胞提供營養和保護。它還可以吸附細胞表面的冰晶,防止細胞被冰晶損傷。DMSO作為滲透性保護劑,在梯度降溫過程中隨著細胞凝結逐漸滲透到細胞內部,降低細胞內外溶液中的電解質濃度,阻止細胞內水分外滲,避免細胞過分脫水皺縮,減少冰晶的生成。

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但是作為占比最大的胎牛血清存在批間差異、成分不明確且價格昂貴等問題,一直以來都是科研工作者極力想解決的痛點。另一方面DMSO具有毒性,凍存過程中也會導致一部分的細胞提前死亡。所以實驗室工作人員會選擇多凍存幾支,但是這樣也增加了血清使用量,從而導致整個凍存過程成本ji高。

綜上所述使用方法和痛點,逐漸出現了無血清無DMSO的細胞凍存液,詳情見“BioProE細胞凍存液(不含蛋白、DMSO和血清)使用方法”。

 

 


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