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如何選擇合適的瓊脂糖？

來源：上海牧榮生物科技有限公司 2025年05月08日 15:50

Genaxxon 提供多種高質量瓊脂糖，所有瓊脂糖均具有低硫酸鹽含量和低 EEO（電內滲）值。它們普遍適用于所有凝膠緩沖液系統，當然也不含 DNase 和 RNase。

仍然不確定哪種瓊脂糖適合您的實驗？下面的圖表和選擇指南將幫助您為您的應用做出的選擇。

瓊脂糖凝膠的制備首先將瓊脂糖溶解在電泳緩沖液（TAE 或 TBE）中。冷卻后，瓊脂糖形成凝膠，其孔徑直接取決于瓊脂糖濃度。濃度越高，毛孔越小，ge l 越緊。這種特性會影響分子的分離 – 較大的 DNA 片段比較小的 DNA 片段在凝膠中被阻擋得更多。

在電場中，帶負電的 DNA 分子通過凝膠的孔向正極遷移。較小的分子比較大的分子更快地通過孔，從而實現基于尺寸的分離。

SafeGel 等熒光染料可替代有毒的溴化乙錠，使 DNA 條帶可視化。DNA 條帶的分析是使用 DNA 分子量標準作為大小和濃度的參考來完成的。

除了瓊脂糖濃度外，瓊脂糖的帶電基團和使用的電泳緩沖液也會影響 DNA 分子分離：

瓊脂糖的帶電基團（丙酮酸和硫酸鹽基團）決定了電內滲（EEO 值）
負硫酸根離子與凝膠基質結合，而陽離子（K+、Na+）可自由移動。在電泳過程中，兩組相互移動，導致不需要的制動效果。因此，高 EEO 值（例如，瓊脂糖中的高硫酸鹽含量）會減慢 DNA 遷移并導致條帶拖尾。
TAE 緩沖液：具有低離子強度和低緩沖能力。建議用于分離較大的 DNA 分子（從 1 kb 開始），以及之后分離分離的 DNA 時。
TBE 緩沖液：具有高離子強度和高緩沖能力。它與較小的 DNA 分子形成更清晰的條帶，推薦用于分離小 DNA 分子（<1kb）。

Genaxxon 提供幾種高分辨率瓊脂糖：

瓊脂糖的熔解和凝膠化溫度會受到化學修飾的影響，通常會減少負責交聯瓊脂糖扭曲多糖鏈的氫鍵數量。修飾程度直接影響瓊脂糖的熔解和凝膠溫度。

低熔點瓊脂糖的特殊性質：

GENAXXON 提供兩種低熔點瓊脂糖：

首先用限制性內切酶消化 DNA，然后通過瓊脂糖凝膠電泳分離。堿性處理將分離的 DNA 分裂成單鏈，然后將其轉移到硝酸纖維素膜上（印跡）。添加與靶序列互補的標記 RNA 探針。如果序列存在于膜上，則探針與其結合（雜交），并且可以根據標記進行檢測。

推薦用于印跡實驗的瓊脂糖：

PFGE 是一種確定染色體 DNA 片段大小（30-50kb）、遺傳指紋圖譜、細菌基因組分型或病原體鑒定的方法。與正常瓊脂糖凝膠電泳的不同之處在于使用周期性反轉的電場，這顯著提高了 30-50 kb 范圍內的分辨率。

推薦用于 PFGE 的瓊脂糖：

噬菌斑測定可檢測和定量感染性病毒。對于細胞培養：孵育含病毒的瓊脂糖層，孵育后刮掉瓊脂糖并對細胞進行染色。病毒斑塊表現為透明斑點。對于細菌培養：將敏感細菌與瓊脂糖混合并鋪板，然后加入病毒（噬菌體）。孵育后，噬菌體噬菌斑被評估為透明斑點。

推薦用于噬菌體噬菌斑測定的瓊脂糖：

免疫擴散是一種用于檢測抗原抗體反應的免疫化學測試。一種流行的方法是 Ouchterlony 測試，將抗原和抗體移液到瓊脂糖涂層玻璃板上的預打孔中，然后它們相互擴散。在抗原和抗體以同等濃度相遇的地方形成沉淀線。

推薦用于免疫擴散的瓊脂糖：

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