在哺乳動物細胞培養領域，RPMI-1640 培養基以其性能和廣泛的適用性脫穎而出。本文將深入探討 RPMI-1640 培養基的配方、應用以及操作使用要點。

一、RPMI-1640 培養基的配方與特點

RPMI-1640 是由 Moore 等人于 1967 年在 Roswell Park Memorial Institute 開發的細胞培養基，是改進型的 McCoy's 5A 培養基，使用碳酸氫鹽緩沖系統。RPMI-1640 培養基在基礎成分上添加了 10% 胎牛血清和 1% 雙抗（青霉素 - 鏈霉素溶液）。這種配方為細胞提供了全面的營養支持和保護。

即用型配方

RPMI-1640 培養基（含 10% 血清，1% 雙抗）經過精心配制，無需額外添加成分，開瓶即可直接用于細胞培養。這種即用型設計大大簡化了實驗前的準備工作，減少了因配制培養基帶來的誤差和污染風險。特別適合那些對時間敏感的實驗和需要快速啟動培養的場景。

營養全面

RPMI-1640 培養基本身含有豐富的營養成分，包括各種氨基酸、維生素、礦物質和葡萄糖。10% 胎牛血清的添加進一步豐富了培養基中的生長因子和細胞黏附因子，支持細胞的快速增殖和健康生長。1% 雙抗成分則有效抑制細菌和真菌的生長，降低培養過程中的污染風險。

二、RPMI-1640 培養基的應用范圍

廣泛適用于多種細胞類型

RPMI-1640 培養基適用于多種哺乳動物細胞的培養，包括 Jurkat、MCF-7、PC-12、PBMC、星型膠質細胞和腫瘤細胞等。它尤其適用于懸浮細胞的培養，為這些細胞提供了理想的生長環境，促進細胞的旺盛生長和穩定傳代。

滿足多種研究和生產需求

在生物醫學研究中，RPMI-1640 培養基被廣泛用于細胞的長期培養、基因轉染、藥物篩選等實驗。在生物制藥領域，它為重組蛋白表達和疫苗生產提供了穩定的培養平臺。

三、RPMI-1640 培養基的操作使用方法

儲存與準備

RPMI-1640 培養基應保存在 4℃左右的低溫環境中，避免光照直射和溫度波動過大。在使用前，將培養基從冰箱中取出，使其恢復至室溫，以確保細胞在接種時不會因溫度驟變而受到應激。

細胞培養步驟

1. 細胞接種：根據細胞類型和實驗需求，將細胞以適當的密度接種到培養容器中。對于貼壁細胞，可以使用培養瓶、培養皿或培養板；對于懸浮細胞，通常使用搖瓶或懸浮培養袋。

2. 培養條件：將接種后的細胞放入細胞培養箱中，設置溫度為 37℃，濕度保持在 95% 以上，二氧化碳濃度為 5% 左右。這些條件有助于維持培養基的 pH 值穩定，為細胞提供一個適宜的生長環境。

3. 定期換液：根據細胞的生長速度和代謝需求，定期更換培養基，一般每 2 - 3 天更換一次。換液時，吸出舊的培養基，用適量的 PBS 或無菌生理鹽水輕輕沖洗細胞，再加入新鮮的 RPMI-1640 培養基。

4. 觀察與記錄：在細胞培養過程中，定期使用倒置顯微鏡觀察細胞的形態和生長狀態，記錄細胞的生長曲線和分裂情況。注意觀察細胞的貼壁情況、細胞密度和細胞形態是否正常。

凍存與復蘇

當細胞生長達到實驗要求的密度或狀態時，可以進行凍存。凍存時，使用含 10% DMSO 的凍存培養基，將細胞懸浮液分裝到凍存管中，放入程序降溫盒中逐步降溫，最終保存于液氮罐中。復蘇時，將凍存管從液氮中取出，迅速放入 37℃水浴中快速解凍，然后將細胞懸液轉移到培養容器中，加入新鮮的 RPMI-1640 培養基，繼續培養。

傳代操作

對于貼壁細胞，當細胞生長達到 80% - 90% 匯合度時，可以使用胰蛋白酶進行消化，按照適當的比例進行傳代。對于懸浮細胞，直接稀釋細胞懸液進行傳代。傳代比例根據細胞類型和實驗需求確定，一般為 1:2 - 1:10。

四、RPMI-1640 培養基的優勢與注意事項

優勢

• 廣泛適用性：適用于多種哺乳動物細胞培養，特別是懸浮細胞。

• 營養全面：含有豐富的營養成分和生長因子，支持細胞的快速增殖和健康生長。

• 即用型配方：無需額外添加成分，開瓶即用，節省時間，減少污染風險。

• 成本效益：提供多種成分組合的細胞培養基，滿足各類需求。

注意事項

• 儲存條件：嚴格控制儲存溫度和環境，避免反復凍融。

• 血清選擇：選擇高質量的胎牛血清，以確保細胞生長和實驗結果的可靠性。

• 定期評估：定期評估培養基的性能和細胞的生長狀態，必要時更換培養基或調整培養條件。